杨晓秋 刘国庆 寇源锋 / 重庆泰濠制药有限公司

气相色谱法测定泊马度胺原料药中N,N-二甲基甲酰胺、乙酸等残留溶剂

杨晓秋 刘国庆 寇源锋 / 重庆泰濠制药有限公司

用气相色谱对泊马度胺原料药中N,N-二甲基甲酰胺、乙酸、四氢呋喃、甲醇、乙醇、1,4-二氧六环残留溶剂分析方法进行开发，采用气相色谱仪氢火焰离子化检测器、色谱柱:DB-WAX（30-m×0.32-mm），膜厚0.5μm 按内标法检测N,N-二甲基甲酰胺等残留溶剂的含量。结果：6个溶剂的分离度都大于2.0，线性范围为6个残留溶剂的定量限至ICH限度值120% ，r最小为0.99912，回收率为95.9~102.9%，检出限最大40.1ppm，精密度RSD最大4.6%。结论：该方法准确、灵敏、快速、精密度高，适用于泊马度胺6个残留溶剂的检测，同时符合ICH要求。

泊马度胺；气相色谱；N,N-二甲基甲酰胺；乙酸

泊马度胺由美国赛尔基因（Celgens）公司研发一种新型免疫调节剂，2013年2月通过FDA批准上市，用于治疗复发性及难治性多发性股市瘤。

在合成工艺中用到溶剂N,N-二甲基甲酰胺、乙酸、四氢呋喃、甲醇、乙醇、1,4-二氧六环，因此需要按照ICH指南，控制产品中使用的残留溶剂限度。鉴于该产品理化性质原因，在水和醇类等很多溶剂的溶解性差，在N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜有一定的溶解性，我们采用二甲亚砜做溶剂，同时N,N-二甲基甲酰胺高沸点溶剂，乙酸的灵敏度低，如果采用顶空进样，检出限不能满足要求，因此我们采用自动进样器液体进样方式进样，提高了灵敏度，同时加入内标正丙醇，保证了方法的准确度和精密度。

1.仪器与试剂

2.试验过程与结果

2.1 色谱条件

色谱柱: DB-WAX（ 30-m×0.32-mm），膜厚0.5μm

柱温：

气化室温度：220℃ FID检测器温度：260℃

载气：N2；载气流速：1.0ml/min；进样量：1μl；分流比：20:1

2.2 溶液的配制

2.2.1 空白：二甲亚砜。

2.2.2 内标贮备溶液的配制：取正丙醇约0.5g，置100mL量瓶中，加二甲亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀。

2.2.3 对照贮备溶液的配制：取四氢呋喃约0.072g，甲醇约0.3g，乙醇约0.5g，1,4-二氧六环约0.038g，N,N-二甲基甲酰胺约0.088g，乙酸约0.5g，精密称定，置同一100mL量瓶中，加二甲亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀。

对照溶液的配制：吸取0.5ml对照贮备溶液于5ml容量瓶中，加入0.5ml内标贮备溶液，用二甲亚砜稀释至刻度摇匀；（四氢呋喃约为72μg/ml，甲醇约为300μg/ml，乙醇约为500μg/ml，1,4-二氧六环约为38μg/ml，N,N-二甲基甲酰胺约为88μg/ml，乙酸约为500μg/ml）供试品溶液的配制：取供试品约0.5g，精密称定，置5ml容量瓶中，加入0.5ml内标贮备溶液，用二甲亚砜稀释至刻度摇匀。

2.3 系统适用性与专属性试验

将空白、对照溶液按测定方法，分别注入色谱仪，记录色谱图，空白对待测溶剂峰无干扰，从表3可见，通过系统适用性试验，各溶剂峰分离度最小为6.14，表明该方法专属性强，对照溶液分离度图谱见图1。

2.4 样品检测与重复性

重复称取7份样品，检测残留溶剂，测得乙醇为1051ppm，N,N-二甲基甲酰胺为182ppm，其他溶剂均未检出，均符合ICH限度要求，测得RSD最大为4.60%，可见该方法精密度好 ，对样品中的残留溶剂有较好的检测指示能力。

2.5 线性与范围

根据有机挥发性残留溶剂规定的定量限至限度值120%配制溶液，测得的线性相关系数r最小为0.99912，可见该检测方法在规定的浓度范围内有较好的线性。

2.6 检出限

根据S／N=3±1时为检测限，在供试品中四氢呋喃的检测限为10.8ppm，甲醇的检测限为19.3 ppm，乙醇的检测限为20.0 ppm，1,4-二氧六环的检测限为19.6 ppm，N,N-二甲基甲酰胺的检测限为31.1 ppm，乙酸的检测限为40.1ppm。

2.7 准确度

通过在已知准确浓度的样品中加入各溶剂规定限值的80%、100%、120%浓度的溶剂，测得的回收率为95.9~102.9%，可见该方法准确度好。

3. 讨论

ICH 3C明确规定药品用到的残留溶剂必须质量控制，该产品用到ICH II类和III类溶剂，本方法都对用到的残留溶剂进行了检测，而且符合ICH限度要求，采用二甲亚砜为稀释液解决了该产品溶解性不好的问题，从2.6项下可见，残留溶剂检出限最大为40.1ppm，方法灵敏度高，回收率均在90-110%之间，说明本方法准确，在待测溶剂定量限至限度的120%范围内线性相关系数为最小0.99912，表明呈良好的线性，因此本方法适用于泊马度胺原料药的残留溶剂检测。

[1]《药品生产质量管理规范》（2010年修订）.

[2]《中国药典》2015版9101药品质量标准分析方法验证指导原则.

[3]USP（1225）（Validation of Compendial Methods）.

[4]ICH出版的ICHQ2A、ICHQ2B.