常丽娟，宋 君，张富丽，刘文娟，唐春燕，王 东，尹 全

(四川省农业科学院分析测试中心，四川 成都 610066)

实时荧光定量PCR方法检测转基因玉米MIR604

常丽娟，宋 君*，张富丽，刘文娟，唐春燕，王 东，尹 全

(四川省农业科学院分析测试中心，四川 成都 610066)

转基因玉米MIR604是瑞士先正达公司2005年研发的抗虫玉米，中国于2008年批准MIR604进口作为食品和饲料的加工原料。为了精确定量检测MIR604及其加工产品，在MIR604的左侧边界序列和玉米基因组之间设计引物和探针，成功建立了MIR604品系特异实时荧光定量PCR检测方法。采用该方法设计的引物和探针，对6种非转基因作物、MIR604及其他非目标转基因作物进行检测，除MIR604外，其余样品均未检测到MIR604分子片段的扩增信号；对已知含量为1%的MIR604标准品进行定量检测，测量值为1.07%，接近真实值1%；灵敏度实验结果显示，该方法能检测到仅5个拷贝的MIR604分子片段。该试验所建立的MIR604品系特异实时荧光定量PCR检测方法具有较高的特异性、准确度及灵敏度，可用于转基因玉米MIR604的定量检测。

转基因玉米MIR604；实时荧光定量PCR；特异性；准确度；灵敏度

转基因作物在全球快速发展，据国际农业生物技术应用服务组织(ISAAA)发布的一份报告，转基因作物的种植面积从1996年的170万hm2上升至2015年的1.797亿hm2，种植的转基因品种包括转基因大豆、玉米、棉花和油菜，其中玉米是获得商业种植批准最多的转基因作物。James等[1]调查发现，全球有超过120个转基因玉米品种在二十多个国家被批准可作为食品和饲料的加工原料。转基因玉米MIR604是转入苏云金芽孢杆菌Cry3A基因的抗虫玉米，由该基因编码的毒素蛋白由3个不连续的结构域组成，对鞘翅目昆虫具有特异毒性[2]。……