尹利方，任 禛,2,3*，夏体渊**，朱维贤，陈泽斌,2，靳 松，颜家亮，赵晓红

(1.昆明学院农学院，云南 昆明 650214；2.云南省都市特色农业工程技术研究中心，云南 昆明 650214；3.云南省高校特色生物资源开发与利用重点实验室，云南 昆明 650214；4.昆明市农业科学研究院，云南 昆明 650034)

应用克隆文库构建法研究枇杷根系AMF多样性

尹利方1，任 禛1,2,3*，夏体渊1**，朱维贤4，陈泽斌1,2，靳 松1，颜家亮1，赵晓红1

(1.昆明学院农学院，云南 昆明 650214；2.云南省都市特色农业工程技术研究中心，云南 昆明 650214；3.云南省高校特色生物资源开发与利用重点实验室，云南 昆明 650214；4.昆明市农业科学研究院，云南 昆明 650034)

【目的】为进一步探寻和利用宝贵的AMF资源提供有效的研究方法。【方法】在昆明学院随机采集枇杷根系作为实验样品，采用CTAB法提取根系 DNA，进行18S rDNA PCR扩增，产物连接转入大肠杆菌JM109受体，建立18S rRNA部分基因克隆文库。从文库中随机选取35个白色克隆子，经鉴定，获得30个阳性克隆子，将阳性克隆子测序。运用Mothur等软件分析阳性克隆子序列，确定9条差异序列，为不同的AMF序列。【结果】克隆文库的Coverage C值为93.3 %，克隆文库的Shannon-Wiener指数为2.079，Simpson指数为0.87，且Rarefaction曲线比较饱和。9个序列分为了两个不同的类群，代表不同AMF种类；球囊霉属(Glomus)是枇杷根系的主要AMF类群，OUT1和OTU2代表了文库中的主要类型，其中OTU1为根内根生囊霉(Rhizophagusirregularis)；OTU3、OTU4、OTU5和OTU6代表着文库中的常见类型；其余序列则为枇杷根系中的少见或稀有AMF类型。【结论】球囊霉属(Glomus)是枇杷根系的主要AMF类型，其中根内根生囊霉(Rhizophagusirregularis)为优势AMF种类。

枇杷；AMF；克隆文库；18S rRNA基因；系统发育分析

丛枝……