任晓宇，裴晓静，张少云，谢立娜，杜文博，锁 然

(河北农业大学 食品科技学院，河北 保定 071000)

实验技术

微波水解衍生高效液相色谱法测定饲料中的氨基酸

任晓宇，裴晓静，张少云，谢立娜，杜文博，锁 然*

(河北农业大学 食品科技学院，河北 保定 071000)

建立了一种微波水解衍生高效液相色谱同时测定饲料中17种氨基酸含量的方法。采用2,4-二硝基氯苯作为柱前衍生试剂，利用C18色谱柱分离。二极管阵列检测器进行检测，检测波长为360 nm，并对微波水解时间及温度进行优化。17 种氨基酸在2.5～50 mg/L范围内呈良好线性关系，相关系数为0.990 7～0.999 9；相对标准偏差为0.88%～4.2% ；加标回收率为90.6%～107.2%；检出限为0.15～2.37 mg/L。研究结果表明，150 ℃下微波水解16 min的结果与传统加热水解(110 ℃，24 h)的效果基本相同。该方法分析时间较短，灵敏度较高，可用于饲料中氨基酸含量的检测。

微波水解；氨基酸；高效液相色谱法；柱前衍生；饲料

饲料中的蛋白质是畜禽的重要营养物质，动物对蛋白质的需求源自对氨基酸的需求。因此，饲料中的氨基酸含量是衡量饲料质量的重要指标。氨基酸的国家标准检测方法[1]是以茚三酮为衍生剂试剂采用柱后衍生的离子色谱法。但该方法分析时间长，工作量大，且有一定的实验误差[2]。柱前衍生高效液相色谱法测定氨基酸具有分析时间较短、灵敏度高等优点[3],近年来的应用日益增多。对蛋白质中氨基酸的分析使用最为广泛的衍生方法是加热水解。但该法样品前处理时间较长，操作繁琐，劳动强度大[2]。

1975年Abu-Samra等[4]首次将微波技术应用于蛋白质的水解。……