陈俊+叶锦霞+林洁+林婧+林秋祥+刘献祥+吴广文

【摘 要】目的：观察独活寄生汤含药血清对体外培养的大鼠退变软骨细胞表达miRNA-140的影响，探讨独活寄生汤防治骨关节炎的作用机制。方法：4周龄SD大鼠膝关节软骨建立体外培养的软骨细胞，采用Ⅱ型胶原原位杂交法对第3代（F3）软骨细胞进行鉴定。用10 ng·mL-1白细胞介素-1β诱导F3软骨细胞，复制退变软骨细胞模型。成功后随机分为模型组和独活寄生汤含药血清组，分别在培养24，48，72 h后采用TaqMan real-time PCR法检测各组miRNA-140表达。结果：独活寄生汤含药血清组

miRNA-140相对表达量随着干预时间的延长逐渐增加，差异有统计学意义（P < 0.05）。结论：独活寄生汤治疗骨关节炎的部分作用机制是有效促进退变软骨细胞miRNA-140的表达。

【关键词】 骨关节炎；独活寄生汤；含药血清；软骨细胞；miRNA-140

骨关节炎（osteoarthritis，OA）属中医学“痿证”“痹证”“骨痹”范畴，肝肾亏虚致其虚为病之内因，风寒湿邪致其痹为病之外因，故本质为本虚标实、本痿标痹[1]。独活寄生汤出自唐·孙思邈《备急千金要方》，具有扶正祛邪、标本兼顾的特点，能针对OA的病因病机起治疗作用，能有效缓解膝OA的临床症状[2-3]。实验研究发现，独活寄生汤能有效促进软骨细胞增殖[4-5]，抑制软骨细胞凋亡[6]，延缓软骨退变[7]，但其作用机制尚未完全明确。本实验通过观察独活寄生汤含药血清对白细胞介素（IL）-1β诱导的退变软骨细胞表达miRNA-140的影响，进一步探讨独活寄生汤治疗OA的作用机制。

1 实验材料

1.1 实验药物 独活寄生汤由独活9 g，桑寄生、秦艽、杜仲、防风各6 g等组成，由福建中医药大学附属第二人民医院药剂科提供。使用时用蒸馏水1 L，煎煮2次，每次煎1 h，将2次药液合并，浓缩成1 g·mL-1，保存在-20 ℃冰箱中，备用。……