马 涛，刘为民，曲 琳，杨笑染，薛希均，刘铭芳，邓 斌，周智勇，陶宝鸿

·临床研究·

水蛭素对喉癌荷瘤小鼠的抑瘤作用研究

马 涛1，刘为民1，曲 琳1，杨笑染1，薛希均2，刘铭芳1，邓 斌1，周智勇1，陶宝鸿3

目的观察水蛭素对喉癌荷瘤小鼠的抑瘤作用。方法将40只小鼠随机分为4组，每组10只，小鼠左前腋窝下皮下种瘤建立实体瘤模型，阳性对照组以氟尿嘧啶20mg/kg腹腔注射；水蛭素高剂量组以2.5g/(kg·d)灌胃；阴性对照组以生理盐水0.1mL/(10g·d)灌胃；水蛭素低剂量组以1.2g/(kg·d)灌胃。连续用药14 d后处死小鼠取荷瘤鼠肿块称重，并将瘤组织包埋、固定、切片、染色等，计算抑瘤率，利用Image-Pro Plus 6.0图像分析软件检测瘤组织中C-met的表达。结果水蛭素高、低剂量组对小鼠喉癌细胞均有明显的抑制作用，抑瘤率分别为40.1%、26.92%，与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)；4组中C-met均呈阳性表达，水蛭素高、低剂量组C-met的表达均下调，与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论水蛭素对小鼠喉癌细胞抑制作用显著。

水蛭素;喉癌;C-met;抑瘤作用

美国的一项研究分析表明喉癌的发病率占头颈癌的25%[1]，我国喉癌的发病率约占全身癌症的1%～5%[2]。从水蛭中可以提取出一种活性成分较高的物质——水蛭素(Hirudin),它可以抑制凝血酶。多项研究表明在全身肿瘤中，C-met基因均呈现过度表达。本研究中，我们建立喉癌荷瘤小鼠模型，观察水蛭素对小鼠喉癌的抑制作用。

1 材料与方法

1.1 实验材料：2015年自宁夏医科大学动物中心购买小鼠雌雄各半共40只，周龄(8±1)周，体质量(20±0.5)g。小鼠喉癌瘤细胞由南京科佰科技有限公司提供。自上海信裕生物科技公司购买重组人水蛭素；自天津金耀氨基酸公司购买氟尿嘧啶注射剂，规格10 mL，25 g/支；自北京哲成科技有限公司购买C-met SP免疫组织化学检测试剂盒。……