吴慧娟，刘艳，王锡锋



小麦矮缩病毒引起的植株矮化与赤霉素代谢的相关性分析

吴慧娟，刘艳，王锡锋

（中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室，北京100193）

【目的】由异沙叶蝉（）传播的小麦矮缩病毒病是近年来中国西北部麦区严重发生的小麦病毒病害之一。受侵染的小麦植株严重矮化，有效分蘖减少，产量损失严重。论文旨在明确小麦矮缩病毒（，WDV）侵染小麦植株后矮化症状形成与赤霉素代谢调控的关系，为该病害的防治打下基础。【方法】以小麦品种扬麦12为试验材料，以异沙叶蝉为传毒介体饲毒后转移到1叶期的健康幼苗（3头/株）上进行传毒，同时以无毒异沙叶蝉取食健康幼苗为对照。根据试验需要，不同时间取样备用。为保证试验的准确性，经PCR检测为阳性的作为处理组试验材料；采用间接酶联免疫吸附（ELISA）法，利用植物赤霉素（GA3）试剂盒测定分析侵染第21天取样的小麦叶片赤霉素含量；将带毒条沙叶蝉接种的小麦苗分为两个平行处理组，接种后第7天分别用GA3（浓度为50 mg·L-1）和H2O进行叶面喷施处理，每隔一周处理一次。以无毒叶蝉接种后长势一致的小麦苗作为对照组，根据株高统计结果分析外施赤霉素对受侵染小麦植株的表型变化；以山羊草（）的内根-贝壳杉烯合成酶（-kaurene synthase-like 3，）的基因编码区序列为参考基因设计引物（KSL3-F：5′-ATGATGGTGAATCCGCCGC-3′；KSL3-R：5′-TTAATGGTTGATCTTTGTTT-3′），对扬麦12的进行克隆和序列分析；分别取接种后7、14和21 d的小麦植株叶片，提取RNA后反转录，以克隆得到的基因序列设计引物（TaKSL3-F：5′-GAGACATGTGCCATGGCGTTC-3′；……