陶璐(长沙医学院基础医学院,湖南 长沙 421019)

铁(Ⅱ)配合物的合成与ct-DNA作用的光谱分析

陶璐(长沙医学院基础医学院,湖南 长沙 421019)

设计合成一个铁(Ⅱ)配合物[Fe(LA)2Br2](LA＝鹅掌楸碱)，以ct-DNA为靶点，通过紫外-可见光谱、荧光光谱和DNA粘度实验研究了配合物与ct-DNA的键合方式。研究表明所合成的配合物与DNA之间存在插入作用和静电作用。

配合物；ct-DNA；光谱分析；插入作用

鹅掌楸碱是一种典型的异喹啉类生物碱，具有显著的抗肿瘤、抗病毒、抑菌消炎等活性。铁元素是人生命体内必需的微量元素，尤其是二价铁，每个血红素都是由卟啉衍生物与铁(Ⅱ)形成的络合物。本文以鹅掌楸碱为配体，与铁(Ⅱ)离子配位合成配合物[Fe(LA)2Br2](配合物晶体结构见图1)。以ct-DNA为靶点，通过紫外-可见光谱、荧光光谱和DNA粘度实验研究了该配合物与ct-DNA的键合方式，为研究此类配合物的药理活性提供了科学依据。

图1 配合物的晶体结构图

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

紫外-可见光谱仪；SHIMADZU RF-5301PC荧光光谱仪；Brookfield DV-II pro数字式旋转粘度计；数显多功能测量仪。

鹅掌楸碱；FeBr2；乙醇；十二烷基磺酸钠(SDS)、三羟甲基氨基甲烷(Tris)购于Sigma公司、小牛胸腺DNA(ct-DNA)购于华美生物工程公司； GelRed购于Biotium公司)；实验用水均为二次蒸馏水。

Tris-HCl-NaCl缓 冲 液：Tris 0.005 mol/L，NaCl 0.05 mol/L，pH值以盐酸滴定调节至7.35；

BPE 缓 冲 液 ：Na2HPO40.006 mol/L，NaH2PO40.002 mol/L，Na2EDTA0.001 mol/L，pH = 6.99 ；DNA 纯 度 ：将适量的ct-DNA溶于Tris-HCl-NaCl 缓冲液中，经紫外吸收光谱测定，在260nm和280nm处的吸光度符合：A260nm/A280nm≈1.8～1.9:1，表明DNA中不含蛋白质，因此使用之前不再纯化[1]。DNA储液浓度为2×10-3mol/L；GelRed浓度：将 原 始 的0.018 mol/L的GelRed用Tris-HCl-NaCl缓 冲 液稀释为1.8×10-3mol/L的溶液；SDS：0.02 mol/L。

1.2 实验方法

(1) 配合物的合成实验

称 取LA(0.05 mmol,0.014 g)和FeBr2(0.05 mmol,0.001 g)加入到一端封闭……