赵新明

（河北省张家口市动物卫生监督所075000）

点眼接种新城疫苗对柴鸡免疫效果影响

赵新明

（河北省张家口市动物卫生监督所075000）

目前，非典型新城疫是危害养禽业严重的疾病之一，此类病是由新城疫病毒引起的病毒性疾病，只能进行预防，临床上没有专门的药物给予很好的治疗。预防新城疫的疫苗种类繁多，免疫方法多样，免疫剂量越用越大，但该病还是频发，给养殖户造成很大的损失。点眼接种虽然费工费时，但免疫效果确切，不存在漏免情况。现就不同剂量新城疫LaSota苗点眼免疫对柴鸡免疫效果做一分析，以确定最适合的免疫剂量，在生产上推广应用。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1日龄柴鸡雏鸡600只，购于河北北方学院柴鸡养殖基地；鸡新城疫低毒力活疫苗 （LaSota株，至少106.0EID50/羽份)，购于瑞普生物制品厂。

1.2 试验处理

将全部试验鸡随机各平均分成4组，每组150只，每组3个重复，每个重复50只。自由采食、自由饮水，35日龄前按常规饲养管理程序、免疫程序进行，35日龄进行ND-La弱毒活疫苗免疫，试验1、2、3、4组分别用2、3、4、5倍量点眼免疫。具体免疫方法是将1000羽份疫苗分别用60～80ml不同比例的专用稀释液稀释，制成2、3、4、5倍量液体，每只鸡滴眼1滴。

1.3 测定指标

1.3.1 血清抗体滴度 (Hl)测定

分别在免疫前和免疫后1周、2周、3周、4周在不同免疫途径的各分组随机挑起5只鸡，称重，经颈动脉采血，制备血清，采用微量血凝集抑制试验 (HI)检测ND抗体滴度，结果以Nlog2表示。

1.3.2 免疫器官指数测定

上述采血完毕，采集脾脏、胸腺、法氏囊3种免疫器官，称取湿重，按公式：脾脏 （胸腺或法氏囊)指数=脾脏 （胸腺或法氏囊)湿重 (g)/鸡活体重 (kg)，计算免疫器官指数。

1.4 数据统计

所有试验数据均用Excell表和Spss19.0统计软件进行分析。

2 结果

2.1 点眼免疫对HI抗体滴度的影响变化规律

点眼免疫HI抗体滴度的变化规律见图1。

图1 点眼免疫后新城疫HI效价变化规律

图2 点眼免疫后胸腺指数变化曲线

图3 点眼免疫后法氏囊指数变化曲线

图4 点眼免疫后脾脏指数变化曲线

由图1直观看出，HI效价1周后3倍量组高于其他组，在免疫后1周测定新城疫HI效价最高，达到8log2，与其他各组差异显著 (P＜0.05)； 免疫 3周测定2、4、5倍量组抗体水平降到保护零界值4log2以下，形成了免疫空白期，很容易感染NDV，保护率明显降低，现在普遍认为抗体水平在6log2以上时，才具有很好的保护率。在免疫4周测定4倍量组新城疫HI效价降到最低。可以看出，不同剂量的点眼免疫剂量新城疫HI效价的消长规律并不相同。从抗体滴度来看，3倍量组优于其他各组。

2.2 点眼免疫对免疫器官指数的影响

点眼免疫对胸腺指数的影响见图2。

由图2可知，点眼免疫后，胸腺免疫指数各剂量组在2周时上升达到高峰，在3周时整体有所下降，4周时又开始上升，且上升高度高于2周，3倍量组最高达4.75±0.08g/kg，其次是5倍量组为4.62±0.03g/kg。在免疫后 1周不同剂量组之间，2倍量组与5倍量组差异不显著；3倍量组最高，与各组间差异极显著；4倍量组胸腺指数最低。

点眼免疫对法氏囊官指数的影响见图3。

由图3法氏囊免疫指数变化曲线可以看出，点眼免疫1周后法氏囊指数3倍量组最高，与2倍量组差异不显著，与4和5倍量组差异极显著；2周后开始下降，3倍量组下降较缓慢，4倍量组在3周略有波动，且各组间存在极显著差异 （P＜0.01)。

点眼免疫对脾脏指数的影响见图4。

由图4可见，脾脏指数在点眼免疫后2周上升达到最高峰，3、4、5倍量组最高超过4g/kg，2倍量最低，为2.49±0.05g/kg，与其他组间存在极显著差异（P＜0.01)。2周之后开始下降，下降幅度较快，4周时3倍量组略高于其他各组，且差异极显著 （P＜0.01)。

3 分析与讨论

点眼免疫主要通过特异性黏膜免疫系统来完成，即黏膜结合淋巴组织（眼结膜、肠道黏膜和生殖道黏膜)诱导产生分泌型IgA，并通过淋巴和血液循环到达全身黏膜组织发挥免疫效应。本试验通过对35日龄雏鸡血清中的抗体监测表明，La Sota弱毒苗点眼免疫，3倍量组鸡体产生抗体水平最高，免疫后1周抗体滴度就上升到最高水平。

胸腺和法氏囊是禽类中枢免疫器官，胸腺参与细胞免疫，法氏囊早期是B细胞发育的主要场所，参与体液免疫；脾脏是外周免疫器官，是T、B细胞定居繁殖的场所，提供特异性细胞免疫和体液免疫力。胸腺、法氏囊和脾脏免疫器官指数，反映免疫力的强弱。点眼接种LaSota苗后2周，免疫器官指数达到高峰，以后下降速度放缓，维持时间较长，3倍量点眼免疫免疫器官指数最高。因此，La Sota弱毒苗点眼免疫以3倍量为最优。