高 瑶，孟星宇，罗玉子，胡永浩，仇华吉*

(1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室，黑龙江哈尔滨 150069；2.甘肃农业大学动物医学院，甘肃兰州 730070)

等温扩增技术的原理及其在病原检测中的应用

高 瑶1,2，孟星宇1，罗玉子1，胡永浩2*，仇华吉1*

(1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室，黑龙江哈尔滨 150069；2.甘肃农业大学动物医学院，甘肃兰州 730070)

等温扩增技术(IAT)作为一种新型的体外核酸扩增技术，与PCR相比，该技术具有特异性强、敏感性高、简单便捷和成本低等优点。目前，等温扩增技术在病原检测方面得以应用，论文对环介导等温扩增(LAMP)、依赖解旋酶的等温扩增(HDA)、依赖核酸序列的等温扩增(NASBA)、链置换等温扩增(SDA)、交叉引物扩增(CPA)5种扩增技术的原理、特点及应用分别予以介绍，为该技术在病原检测的实际应用提供参考。

等温扩增技术；原理；病原检测

体外核酸扩增是分子生物学中一类常规实验技术，Mullis K等[1]在20世纪80年代建立的聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)应用最为广泛。PCR通过变性、退火和延伸3个阶段特异地扩增目的片段。常规PCR技术存在以下缺陷：①PCR仪价格昂贵；②影响扩增因素众多；③耗时较长等。因此，限制了其在基层的推广使用。等温扩增技术(isothermal amplification technology，IAT)是一类更具特色的核酸扩增技术，通过不同的酶和特异性引物在恒定温度下进行快速扩增。与PCR方法相比，等温扩增技术使用的仪器设备简单且扩增时间缩短[2]。

根据反应原理的不同，等温扩增可分为环介……