鸭瘟病毒强弱毒株PCR检测方法的建立
2017-10-11谢丽基谢芝勋黄娇玲张艳芳罗思思谢志勤邓显文钟传德
动物医学进展 2017年8期
谢丽基,黄 莉,谢芝勋*,王 盛,黄娇玲,张艳芳,范 晴,罗思思,谢志勤,邓显文,钟传德
(1.广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室,广西南宁 530001; 2.广西玉林市动物疫病预防控制中心,广西玉林 537000)
鸭瘟病毒强弱毒株PCR检测方法的建立
谢丽基1,黄 莉1,谢芝勋1*,王 盛1,黄娇玲1,张艳芳1,范 晴1,罗思思1,谢志勤1,邓显文1,钟传德2
(1.广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室,广西南宁 530001; 2.广西玉林市动物疫病预防控制中心,广西玉林 537000)
根据基因库中鸭瘟病毒强毒株和弱毒株UL2基因保守区设计特异性引物,优化PCR反应的引物浓度和退火温度等,初步建立了可同时鉴别鸭瘟病毒强毒株和弱毒株的PCR检测方法,并对建立的方法进行了敏感性、特异性验证和临床样品检测。该PCR检测方法最低能检出1 pg的鸭瘟病毒强毒和弱毒DNA模板。对鸭瘟病毒强毒和弱毒模板的检测,得到了与试验设计相符的827 bp(强毒)和299 bp(弱毒)的扩增条带,而对鸭副黏病毒、鸭坦布苏病毒、鸭圆环病毒、番鸭细小病毒、鸭Ⅰ型肝炎病毒、禽流感病毒和小鹅瘟病毒等病原体的检测均为阴性。说明建立了一种敏感性高、特异性好的鉴别鸭瘟病毒强毒和弱毒的PCR检测方法。
鸭瘟病毒;强毒;弱毒; 聚合酶链反应
目前,常用鸭瘟弱毒疫苗预防鸭瘟的发生,但根据实际生产中本地区鸭瘟发生的情况及国内其他学者的报道[4],近年来发生的由鸭瘟强毒引起的鸭瘟,常用的鸭瘟疫苗不能预防该病的发生,鸭瘟强毒和弱毒/疫苗弱毒存在共感染现象。……
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