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大肠杆菌可溶性表达人鳞状上皮细胞癌抗原的制备及应用

2017-09-16陈春野刘剑朱瑞李姝璇叶江辉王玮潘德全徐飞海程通夏宁邵

生物技术通报 2017年9期
关键词:检测方法研究

陈春野刘剑朱瑞李姝璇叶江辉王玮潘德全徐飞海程通夏宁邵

(1. 厦门大学公共卫生学院 分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室 国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,厦门 361102;2. 厦门万泰凯瑞生物技术有限公司,厦门 361003)

大肠杆菌可溶性表达人鳞状上皮细胞癌抗原的制备及应用

陈春野1刘剑1朱瑞1李姝璇1叶江辉1王玮1潘德全1徐飞海2程通1夏宁邵1

(1. 厦门大学公共卫生学院 分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室 国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,厦门 361102;2. 厦门万泰凯瑞生物技术有限公司,厦门 361003)

旨在建立基于大肠杆菌表达系统的高效可溶性表达人鳞状上皮细胞癌抗原(SCCAg)方法,获得具有较好活性的重组SCCAg抗原并应用于建立抗原检测方法。基于pGEX-6P-1载体和大肠杆菌E. coli ER2566菌株开展重组SCCAg抗原可溶性表达纯化方法研究,评价纯化抗原活性,筛选特异性单克隆抗体,初步建立并评价SCCAg抗原检测方法。结果显示,pGEX-6P-1载体和E. coli ER2566菌株可用于建立较高效的可溶性表达和纯化SCCAg抗原的方法,获得了具有较高纯度和活性的重组SCCAg抗原,筛选获得特异性单克隆抗体并初步建立了SCCAg管式化学发光检测方法。建立了有效的基于大肠杆菌表达系统的可溶性表达和纯化SCCAg的方法。

人鳞状上皮细胞癌抗原;大肠杆菌表达系统;可溶性表达;单克隆抗体

鳞状上皮细胞癌抗原(Squamous cell carcinoma antigen,SCCAg)最早发现于子宫颈癌组织,包括两种同源分子SCCA1和SCCA2,二者具有92%的氨基酸同源性和高度相似的抗原表位特征,均属于丝氨酸蛋白酶抑制剂家族[1-4]。……

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