方剑玉，朱文豪，郭小参，白献晓，李海利，徐引弟，郎利敏，王治方，王克领*

(1.河南省农业科学院 畜牧兽医研究所，河南 郑州 450002； 2.南京农业大学 动物医学院，江苏 南京 210095； 3.普莱柯生物工程股份有限公司，河南 洛阳 471000)

表达猪Viperin蛋白重组腺病毒的构建及其对PRRSV复制的抑制作用

方剑玉1,2，朱文豪1，郭小参3，白献晓1，李海利1，徐引弟1，郎利敏1，王治方1，王克领1*

(1.河南省农业科学院 畜牧兽医研究所，河南 郑州 450002； 2.南京农业大学 动物医学院，江苏 南京 210095； 3.普莱柯生物工程股份有限公司，河南 洛阳 471000)

为研究猪Viperin蛋白对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)复制的抑制作用，通过RT-PCR方法扩增猪Viperin基因，并克隆入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV，经菌液PCR、酶切鉴定后进行测序。将PmeⅠ内切酶线性化的重组穿梭载体质粒(pAdTrack-sVIP)电转化大肠杆菌BJ5183，与腺病毒骨架载体pAdEasy-1进行同源重组，提取重组后的腺病毒质粒，经内切酶PacⅠ线性化后转染HEK-293A细胞，装配成完整的病毒粒子rAd-sVIP。重组腺病毒rAd-sVIP感染细胞后，可见绿色荧光蛋白的表达。RT-PCR、Western blot检测结果表明，重组腺病毒rAd-sVIP可正确表达猪Viperin蛋白，且表达的猪Viperin蛋白具有良好的反应原性，对PRRSV的复制具有明显的抑制作用。

猪Viperin蛋白； 重组腺病毒； 抗病毒活性; 猪繁殖与呼吸综合征病毒

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的接触性传染病，1987年首次在美国发现，并于1990在欧洲出现。PRRSV目前已经蔓延至全球，给养猪业造成了重大的经济损失。PRRSV感染主要引起母猪流产、死胎、弱胎、木乃伊胎，以及仔猪呼吸困难、败血症、高死亡率等。……