朱红艳，牛华，符浩，郑永钦，孟强

(1.昆明理工大学附属医院检验科，昆明 650032；2.云南省第一人民医院 a.检验科，b.神经内科，c.临床基础研究所，昆明 650032；3.昆明理工大学医学院，昆明 650032)

·研究生园地·

大鼠原代脑微血管内皮细胞氧糖剥夺/复氧模型中内参基因的选择*

朱红艳1,2a,3，牛华2a，符浩2b，郑永钦2c，孟强2b

(1.昆明理工大学附属医院检验科，昆明 650032；2.云南省第一人民医院 a.检验科，b.神经内科，c.临床基础研究所，昆明 650032；3.昆明理工大学医学院，昆明 650032)

目的 筛选大鼠原代脑微血管内皮细胞氧糖剥夺/复氧(OGD/R)模型中合适的内参基因。方法 实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测3种常用管家基因：3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)、β-肌动蛋白(ACTB)、核糖体蛋白L13A(RPL13A)在大鼠原代脑微血管内皮细胞中的表达水平；并采用GeNorm程序分析得到最稳定的内参基因。结果RPL13A、GAPDH、ACTB基因表达稳定度的平均值(M值)分别为0.590、0.570、0.397。结论 在大鼠原代脑微血管内皮细胞OGD/R模型中表达最不稳定的内参基因是RPL13A，最稳定内参基因是ACTB。

内参基因；GeNorm程序；实时荧光定量PCR；氧糖剥夺/复氧模型；脑微血管内皮细胞

实时荧光定量PCR技术(quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)是分子生物学和细胞生物学中广泛用来检测基因表达的一种常用方法。但是在实际研究过程中，由于易受到细胞数量、标本大小、不同实验条件的影响，必须使用内参基因进行校正才能获得更为真实可信的结果。由于管家基因在不同的物种，不同组织和不同实验条件下的表达也具有特异性，其表达的稳定性是相对的。因此，研究者需要根据自己的样品类型和实验条件选择合适的管家基因作为内参基因。……