张运峰，张淑红，武秋颖，范永山



对玉米大斑病菌附着胞发育过程中糖原和脂肪积累的影响

张运峰，张淑红，武秋颖，范永山

（唐山师范学院生命科学系，河北唐山063000）

【目的】通过研究与附着胞发育的关系，明确附着胞发育过程中对糖原和脂肪合成的调控作用，为阐明玉米大斑病菌()附着胞发育的分子机制打下基础。【方法】以玻璃平板为疏水基质表面，通过“插片分离菌丝”法使菌丝附着于载玻平板表面，然后将附着有菌丝的玻璃平板置于保湿培养皿中22℃、14 h光照和10 h黑暗交替培养，诱导野生型菌株（WT）和基因敲除突变体（）的菌丝形成附着胞，每隔12 h显微观测附着胞的形态和发育过程；分别将附着有未经诱导的WT和菌丝的玻璃平板和经过48 h附着胞诱导的玻璃平板浸没在I2/KI染色液中静置染色48 h，显微观察附着胞发育过程中糖原的变化；分别将附着有未经诱导的WT和菌丝的玻璃平板和经过48 h附着胞诱导的玻璃平板置于-70℃的超低温冰箱中冷冻处理30 min，然后将玻璃平板置于Oil-red O染色液中静置染色24 h，显微观察附着胞发育过程中脂肪的代谢变化；利用real-time PCR技术检测附着胞发育过程中糖原和脂肪合成关键酶基因的表达情况。【结果】玉米大斑病菌WT菌株和菌株利用菌丝尖端在玻璃平板的疏水表面均能够产生附着胞，但菌株的附着胞发育与WT菌株显著不同，WT菌株48 h内为单胞附着胞，诱导48 h后少数附着胞形成了多细胞附着胞，而菌株在诱导24 h后即出现了扭曲附着胞的异形附着胞形态，48 h后还出现了双杈、多杈和O型等多种异常的附着胞类型；……