金 璐, 李 燕, 李志操, 吴西军, 周艳华, 何志旭, 舒莉萍,3,4

(贵州医科大学 1. 组织工程和干细胞实验中心; 2. 儿童医学中心;3. 基础医学院免疫学教研室; 4. 实验动物中心, 贵阳550004)

·第十六届中国西部实验动物管理与学术研讨会论文专题

Irx5a 基因过表达对斑马鱼胚胎早期造血的影响

金 璐1,2, 李 燕2, 李志操1,2, 吴西军1, 周艳华1, 何志旭1,2, 舒莉萍1,3,4

(贵州医科大学 1. 组织工程和干细胞实验中心; 2. 儿童医学中心;3. 基础医学院免疫学教研室; 4. 实验动物中心, 贵阳550004)

目的 探讨易洛魁族同源盒5a(Irx5a)基因对斑马鱼胚胎早期造血相关转录调控因子的影响。方法 于斑马鱼胚胎1细胞受精卵期，显微注射Irx5a-EGFP mRNA斑马鱼胚胎作为实验组、显微注射增强型绿色荧光蛋白(EGFP) mRNA斑马鱼胚胎作为实验对照组、野生型斑马鱼作为空白对照组，应用qPCR检测相关造血转录调控因子在斑马鱼胚胎受精后9 h (9 hpf)、12 h、18 h、24 h和30 h时相的表达水平。结果 实时荧光定量PCR结果表明, 在原始造血转录因子lmo2、scl中, 实验组从9 hpf～24 hpf较另外两组间明显减低; 在定向造血转录因子中，c-myb实验组从12 hpf～24 hpf较另外两组间明显减低，runx1实验组从9 hpf～30 hpf较另外两组间明显减低; 髓系造血转录因子pu.1和红系造血转录调控因子gata-1实验组从9 hpf～30 hpf较另外两组间明显减低，且差异有统计学意义。结论 Irx5a基因在斑马鱼原始造血、成体造血、红系造血、髓系造血的重要转录调控因子中发挥着抑制作用。

斑马鱼; 5a(Irx5a); 造血转录调控因子

造血干细胞(hematopoietic stem cells，HSCs)属多能干细胞，是存在于造血组织中的一群原始造血细胞，具有高度的自我更新、多向分化以及损伤后修复的能力，HSC的自我更新是由促进生长的正调控信号和导致凋亡的负调控信号之间的平衡来实现调控的。……