汪慧娟，赵静，施佐堃，邱玲玉，王甦，张帆，王世贵，唐斌



异色瓢虫3个小分子热激蛋白序列及低温诱导表达分析

汪慧娟1，赵静2，施佐堃1，邱玲玉1，王甦3，张帆3，王世贵1，唐斌1

（1杭州师范大学生命与环境科学学院，杭州310036；2潍坊科技学院植物病虫害研究所，山东潍坊262700；3北京市农林科学院植物保护环境保护研究所，北京100097）

【目的】异色瓢虫()是一种重要的捕食性天敌昆虫，广泛应用于农林害虫的生物防治中。本研究旨在分析探索低温胁迫条件对3个小分子热激蛋白（small heat shock protein，sHSP）抗寒基因相对表达量的影响，为异色瓢虫低温冷藏及其抗寒机制研究提供科学依据。【方法】在转录组获得异色瓢虫基因序列的基础上，根据特异性引物获得（基因登录号：KX161871）（基因登录号：KX161873）和（基因登录号：KX161874）基因cDNA的开放阅读框序列(open reading frame，ORF），采用实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR，qRT-PCR）技术测定异色瓢虫3个sHSP基因在不同发育阶段、短时降温和短时降温后恢复处理、低温储存处理下以及不同色斑的表达水平。【结果】在不同发育阶段处理中，和在蛹期及成虫期高表达；在4龄幼虫第4天表达量显著高于对照组。在短时降温处理中，在降温至0℃和-5℃时表达量显著高于对照组；和在降温过程中表达量显著降低。在短时降温后恢复处理中，3个sHSP基因表达量无显著差异。在低温储藏条件下，实验种群：黑底雌瓢虫表达水平在储存第5天时显著升高，黄底雌瓢虫在储存5—15 d时表达量显著升高；黑底雌瓢虫在储存5—20 d时显著性高表达，黄底雌瓢虫在15 d时显著性高表达；黑底和黄底雌瓢虫无显著性高表达；……