凌 娜，杨艳敏，侯江涛，孟凡荣

(1.商丘学院 风景园林学院，河南 商丘 476000； 2.河南农业大学 生命科学学院,河南 郑州 450002)

酵母双杂交筛选小麦TaMBD2互作蛋白

凌 娜1，杨艳敏1，侯江涛1，孟凡荣2*

(1.商丘学院 风景园林学院，河南 商丘 476000； 2.河南农业大学 生命科学学院,河南 郑州 450002)

为探讨小麦甲基结合域蛋白(TaMBD2)在植物生长发育过程中的调控功能，以TaMBD2基因的全长cDNA为模板，构建诱饵载体pGBKT7-TaMBD2，利用酵母双杂交系统从小麦cDNA文库中筛选TaMBD2互作蛋白。结果共筛选到91个菌斑显蓝色的克隆，对其进行菌液PCR检测并测序，然后在NCBI上进行BLAST比对分析，共获得8个可能与TaMBD2互作的蛋白，分别为二磷酸核苷激酶(NDPK)、ENTH结构域蛋白、SIAN蛋白、Agenet结构域蛋白、C2H2型锌指蛋白、磷酸激酶和2个假定蛋白，其中最有可能的TaMBD2互作蛋白为NDPK。这些候选蛋白主要参与细胞信号传导、抗逆、能量代谢和蛋白质运输等。其中，检测结果中参与植物抗逆胁迫的蛋白质为主要互作蛋白，所占比例为54.9%；参与蛋白质运输的互作蛋白所占比例为25.3%，其余互作蛋白所占比例较小。因此，推测TaMBD2可能主要参与植物对干旱、低温和高盐等非生物胁迫逆境的响应及调控。

小麦； 酵母双杂交； TaMBD2； 互作蛋白

DNA甲基化是生物体普遍存在的一种基因修饰现象，其与基因表达调控等密切相关[1]。有关其调控机制的研究表明,甲基化DNA能特异结合甲基结合域蛋白(methy-binding domain protein,MBD)等反式作用因子，从而参与植物生长发育过程中依赖于DNA 甲基化的基因的表达调控[2]。

目前，关于植物MBD的研究表明，拟南芥AtMBD11被沉默表达后，植物体会发生一系列的表型变化，如叶片锯齿状、开花延迟以及花器易位等[3]。……