饶晓兵 邱桑 庄韬 周林

桑白皮总黄酮对小鼠睡眠功能和自发活动影响的研究

饶晓兵1邱桑2庄韬1周林1

（1南昌大学第四附属医院药学部，江西南昌330003；2南昌市第九医院药剂科，江西南昌330002）

目的研究桑白皮总黄酮对小鼠睡眠功能和自发活动的影响。方法1）催眠：昆明种小鼠随机分为生理盐水对照组、1.0 mg/kg桑白皮总黄酮组、2.0 mg/kg桑白皮总黄酮组、4.0 mg/kg桑白皮总黄酮组（下同），观察给药后桑白皮总黄酮对各组小鼠阈上剂量和阈下剂量戊巴比妥钠睡眠时间和入睡时间（睡眠作用）的影响；2）自发活动：采用抖笼法测定桑白皮总黄酮对小鼠自发活动（镇静作用）的影响。结果1）各剂量的桑白皮总黄酮均能显著缩短阈上剂量和阈下剂量戊巴比妥钠的入睡时间和显著延长阈上剂量和阈下剂量戊巴比妥钠的睡眠时间；2）各剂量的桑白皮总黄酮对小鼠自发活动均具有明显抑制作用，均能明显减少中波和大波的活动。结论桑白皮总黄酮具有明显的抑制小鼠自发活动和镇静催眠作用。

桑白皮总黄酮；催眠；自发活动；动物实验

桑白皮为桑科落叶灌木或小乔木植物除去粗皮的干燥根皮。现代研究表明桑白皮中主要含有黄酮类化合物、香豆素类、苯骈呋喃衍生物、多糖类、甾体和萜类、挥发油等多种成分[1]。桑白皮提取物具有耐缺氧、抗糖尿病、抗炎、抗过敏、平喘等作用[2-14]。但桑白皮总黄酮镇静催眠作用研究未见报道。本实验研究桑白皮总黄酮（Total Flavonoid of Cortex Mori；TFCM）对小鼠睡眠功能和自发活动的影响，可能填补国内外对桑白皮总黄酮镇静催眠研究的空白，并为桑白皮总黄酮的开发提供有价值的基础研究与临床研究资料。

1 材料和方法

1.1 实验药物

1.1.1 药品桑白皮总黄酮的提取：称取桑白皮粉末200 g，加入500 mL乙醚，混匀，充分搅拌后浸泡4 h。过滤浸液，滤渣再次加入同样体积乙醚，重复操作2次，回收乙醚。脱脂滤渣加入50%分析纯乙醇600 mL，控温在50℃，超声萃取30 min。过滤，滤渣再用600 mL 50%乙醇超声萃取，重复操作2次，桑白皮滤液95℃水浴蒸干得桑白皮总黄酮粉末，密封后冰箱保藏备用。

桑白皮总黄酮实验时加数滴吐温-80，用生理盐水配成至所需浓度备用。

1.2 实验动物小鼠：购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司（动物中心许可证号：SCXK（湘）2011-0003，动物合格证号：43004700003244，级别：清洁级。取清洁级昆明种小鼠，每组40只，体重20±2 g，雌雄各半。

1.3 给药方式给药组喂以1.0、2.0、4.0 mg/kg桑白皮总黄酮，对照组喂以同体积的生理盐水（NS）。自由饮食。

1.4 实验仪器二道生理记录仪（LMS-2A）。拉力换能器（JZ100型肌肉张力换能器）。吊笼自制（宽10 cm，高7.5 cm，重100 g），小挂钩。

1.5 方法

1.5.1 小鼠自发活动（镇静作用）拉力换能器与生理记录仪相连，吊笼拉力换能器与相连，小鼠自发活动记录在LMS-2A型二道生理记录仪上。

观察指标：①波幅小于5 mm为小波，小波为小鼠轻度活动，如舐毛、瘙痒等；②波幅在5 mm～10 mm为中波，中波为适当活动，如走动、立起等；③波幅10 mm以上大波，大波为强度活动，如跑动等。

小鼠禁食8 h后实验。小鼠在吊笼中适应3 min，记录小鼠在吊笼中15 s内小鼠正常自发活动情况。小鼠适应15 s后，所有实验小鼠灌胃给予不同剂量的桑白皮总黄酮或等量NS，给药后30 min再次测定15 s内小鼠给予桑白皮总黄酮后自发活动的波幅，观察小鼠给予桑白皮总黄酮后镇静作用的影响。

1.5.2 戊巴比妥钠阈上剂量和阈下剂量（睡眠作用）的影响给药组灌胃给予不同剂量的桑白皮总黄酮或等量NS，15 min后，阈上剂量各组均腹腔注射0.25%戊巴比妥钠，0.20 ml/10 g，阈下剂量各组均腹腔注射0.25%戊巴比妥钠，0.10 ml/10 g，观察小鼠给予桑白皮总黄酮后睡眠作用的影响。

1.6 数据处理各测量指标的数据资料以（x±s）表示，组间比较用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 桑白皮总黄酮对小鼠自发活动的影响结果显示：桑白皮总黄酮能有效抑制小鼠自发活动。提示桑白皮总黄酮具有明显的中枢抑制作用。结果见表1。

表1 桑白皮总黄酮对小鼠自发活动的影响（x±s，n=10）

2.2 桑白皮总黄酮对阈上剂量戊巴比妥钠睡眠时间的影响结果显示：桑白皮总黄酮能有效缩短阈上剂量戊巴比妥钠小鼠入睡时间和延长阈上剂量戊巴比妥钠小鼠睡眠时间，表明桑白皮总黄酮对中枢神经系统有催眠作用。结果见表2。

表2 桑白皮总黄酮对阈上剂量戊巴比妥钠小鼠睡眠时间的影响（x±s，n=10）

2.3 桑白皮总黄酮对阈下剂量戊巴比妥钠睡眠时间的影响结果显示：桑白皮总黄酮能有效增强阈下剂量戊巴比妥钠的催眠作用，使小鼠入睡数目显著增多。表明桑白皮总黄酮与阈下剂量戊巴比妥钠有协同催眠作用。结果见表3。

表3 桑白皮总黄酮对阈下剂量戊巴比妥钠小鼠睡眠时间的影响（x±s，n=10）

3 讨论

研究资料表明，全球约有27%的人存在失眠[14]。失眠是一种睡眠障碍性疾病。长期失眠严重影响着人们身心健康、生活质量和工作效率。现有治疗失眠的药物催眠作用较好，但其副作用大且易产生依赖性[15]。中草药对失眠的治疗历史悠久，且疗效确切，副作用小[16-18]，因此从中草药寻找抗失眠药具有较重要意义。自主活动由大脑皮层控制，大脑皮层兴奋性增强，则自主活动增多，反之亦然。本实验通过对自主活动的作用，间接探讨了其对大脑皮层兴奋性的影响。观察桑白皮总黄酮抑制大脑皮层兴奋性，促进睡眠的影响。我们研究结果表明：桑白皮总黄酮能有效抑制小鼠自发活动；同时桑白皮总黄酮还能有效缩短阈上剂量戊巴比妥钠小鼠的入睡时间，延长阈上剂量戊巴比妥钠小鼠的睡眠时间和增强阈下剂量戊巴比妥钠的催眠作用。提示桑白皮总黄酮具有明显的镇静和催眠作用。

[1]张国刚，黎琼红，叶英子博，等.桑白皮黄酮化学成分的研究[J].中国药物化学杂志，2005，15(2):108-112.

[3]肖海，曾昭毅，叶和杨，等.桑白皮提取物的耐缺氧效应[J].中国临床康复，2006，10(35):187-189.

[4]马松涛，张效科，王秋林，等.桑白皮提取物对糖尿病大鼠坐骨神经结构影响的实验研究[J].中国应用生理学杂志，2008，24(2):201-204.

[5]马松涛，王秋林，张效科，等.桑白皮提取物对实验性糖尿病神经病变的保护作用[J].中华中医药杂志，2006，21(12):776-777.

[6]马松涛，张效科.桑白皮提取物对糖尿病大鼠神经生长因子、碱性髓鞘蛋白表达的影响[J].中国中医基础医学杂志，2007，13(10):760-760，763.

[7]赵文杰，刘菲，刘南，等.桑白皮提取物对胰岛素抵抗2型糖尿病小鼠的降糖作用[J].中国医药指南，2012，10(20):93-94.

[8]韦媛媛，徐峰，陈晓伟，等.桑白皮提取物抗炎实验研究[J].广西工学院学报，2006，17(4):23-26.

[9]冯冰虹，苏浩冲，杨俊杰，等.桑白皮丙酮提取物对呼吸系统的药理作用[J].广东药学院学报，2005，21(1):47-49.

[10]冯冰虹，苏浩冲，杨俊杰，等.桑白皮丙酮提取物舒张血管作用机制研究[J].中药新药与临床药理，2005，16(4):247-250.

[11]秦向征，李良昌，延光海，等.桑白皮水提取物对哮喘模型小鼠支气管肺泡灌洗液中炎性细胞的影响[J].延边大学医学学报，2011，34(2):93-95.

[12]周锋，董志，李晶，等.桑白皮总黄酮抗糖尿病作用的初步研究[J].激光杂志,2010，31(5):93-94.

[13]李良昌，秦向征，延光海，等.桑白皮水提取物的抗过敏作用[J].延边大学医学学报，2011，34(2):103-105.

[14]刘永存，张波.失眠调节机制中西医研究进展[J].按摩与康复医学，2012，3(3)：55.

[15]周晓喜.治疗失眠的药物及其研究进展[J].海峡药学，2011，23(3)：88-90．

[16]许继宗，杨建宇，李彦知，等.失眠的中医药治疗概况[J].中国中医药现代远程教育，2011，9(11)：166-167.

[17]刘顺益.不寐的中医药研究概况[J].福建中医学院学报，2005，15(2)：63-64.

[18]李瑜.中医药治疗顽固性失眠的研究进展[J].继续医学教育，2010，24 (3)：91-93.

Study on Effect of the Total Flavones of Cortex Mori on the Function of Sleep and Spontaneous Activity in Mice

RAO Xiaobing1,QIU Sang2,ZHUANG Tao1,ZHOU Lin1
(1.Department of Pharmacy,the Fourth Affiliated Hospital of Nanchang University,Jiangxi Province,Nanchang 330003,China; 2.Department of Pharmacy,Nanchang No.9 Hospital,Jiangxi Province,Nanchang 330002,China)

Objective To study the effects of the sedative hypnosis of the flavonoids in white mulberry root-bark.Methods Hypnosis: kunming mice were randomly divided into normal saline control group,1.0 mg/kg flavonoids in white mulberry root-bark group,2.0 mg/kg flavonoids in white mulberry root-bark group,4.0 mg/kg flavonoids in white mulberry root-bark group(the same below),observe the effetcs of the dosage groups of mice on the threshold dose and subthreshold dose of sodium pentobarbital to sleeping time and fall-sleep time(sleep effects);spontaneous activity:to determine the effect of spontaneous activity(sedation)in mice by using the shaking-cage method.Results Each dose of flavonoids in white mulberry root-bark group can significantly accelerate the threshold dose and subthreshold dose of sodium pentobarbital fall-sleep time and significantly prolong threshold dose and subthreshold dose of sodium pentobarbital sleeping time.Each dose of flavonoids in white mulberry root-bark group can significantly inhibit the spontaneous activity of the mice,and they can also significantly reduce the activity of middle and large waves.Conclusion Flavonoids in white mulberry root-bark can obviously inhibiting the spontaneous activity of mice and have sedative hypnosis effect.

total flavones of cortex mori;hypnosis;spontaneous activity;animal experiment

10.3969/j.issn.1672-2779.2017.15.063

1672-2779（2017）-15-0145-02

：李海燕本文校对：钱进

2017-06-13）