刘俊得 刘博 鲍克杰 蔺玉华

（1.天津鑫三角水产养殖有限公司 天津 宁河 301500）

（2. 江苏省农业科学院 宿迁农科所 江苏 宿迁 223800）

（3.江苏省泗阳县杨集鱼种场 江苏 泗阳县 杨集村）

泥鳅人工催产、自然受精的繁殖方法

刘俊得1刘博2鲍克杰3蔺玉华2

（1.天津鑫三角水产养殖有限公司 天津 宁河 301500）

（2. 江苏省农业科学院 宿迁农科所 江苏 宿迁 223800）

（3.江苏省泗阳县杨集鱼种场 江苏 泗阳县 杨集村）

本文通过优化泥鳅催产药物配方、采用人工催产、自然受精、反冲式流水孵化方式，研究了本地泥鳅产卵和孵化技术。结果表明：催产药物 （LRH-A2） 4μg/kg、（DOM）2.0mg/ kg和 （HCG）400 IU/kg，三者混合注射。将亲鱼放入产卵网箱，自然产卵。药物效应时间10-14h，催产后18h，将亲鱼移出，收集受精卵，采用反冲式微流水孵化桶孵化。孵化水温24℃-26℃ ，鱼胚胎发育30-35h出膜。采用本方法， 催产率为91.0%， 受精率为95.3%，孵化率为 89.9%；产后亲鱼存活率为90%, 同比人工受精存活率提高了50%。

泥鳅； 人工催产；自然受精；繁殖

泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)隶属于鲤形目(Cypriniformes)、鳅科(Cobitidae)、花鳅亚科(Cobitinae)、泥鳅属(Gobiobotia) ，在我国除西部高原外，自南至北均有分布 。近年来，国内除了养殖本土泥鳅(local loach)和大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)外，部分地区引进了台湾泥鳅(Taiwan loach)养殖。泥鳅是高蛋白、低脂肪的高档水产鱼类，可食用部分占80%，蛋白质含量为18.45%-20.7%， 脂肪含量为2.7%-2.8% ，因其肉质细嫩， 味道鲜美， 营养丰富，被誉为“水中人参”，目前在国内外市场广受欢迎。 泥鳅属杂食性鱼类，耐低氧，对水质要求不高，易于各种规模的养殖。随着泥鳅养殖的发展, 苗种需求量与日剧增, 特别是人工繁殖的优质苗种紧缺, 不能满足市场需求, 为此一些学者进行过一些研究 。以往泥鳅的繁殖技术大多报道为人工授精方法，然而，此方法使产后亲鱼皮肤受伤或药物过量死亡率高达50%。鉴于泥鳅繁殖现有技术的不足，本文提供方法简单、易操作、可规模化生产苗种的繁殖新方法,以期对今后泥鳅的苗种繁殖有所启示。

1.试验材料

试验泥鳅亲鱼来源天津宁河大北镇，天津鑫三角水产养殖有限公司的3龄本地泥鳅。

2.试验方法

2.1 亲鱼挑选

产孵前1个月，挑选3龄亲鱼，将亲鱼强化培育，饲料为天津天世农牧科技有限公司生产泥鳅颗粒饲料，日投喂量为鱼体重3-5%。选择性成熟好、健康雌鱼100尾，腹部饱满、柔软，生殖孔乳突出，全长14.5—23.55cm,体质重20.25—62.80g；选择雄鱼130尾，体色鲜艳，皮肤完整，全长15.12-19.13 cm，体质重17.42—33.47g。

2.2 人工催产

在水温24℃-26℃时 ，从暂养池中挑选亲鱼（雌雄比例为1：1.3）进行催产。注射药物及剂量：促黄体释放激素类似物（LRH-A2）4μg/kg、马来酸地欧酮（DOM）2mg/kg和绒毛膜促性腺激素（HCG）400IU/kg，三者混合注射。注射方法：采用一次性背部肌肉注射，雄鱼剂量减半。

2.3 自然受精和孵化过程

将打针后的亲鱼放入产卵网箱，自然产卵。产卵箱使用100目筛绢布缝制而成，规格为长2.5 mx宽1.0mx 高1.0m。产卵箱放在室内水泥池中，水泥池水体为长5mx 宽8mx深 1.3 m。每网箱投放100组鱼，以水泵循环流水刺激亲鱼产卵和增氧。利用暖气循环水调试水温为24℃-26℃。药物效应时间为10-14h，催产后18h，将亲鱼移出，收集受精卵。

受精卵经清水冲洗后，放入孵化桶。每桶放4.0万-5.0万卵。孵化桶直径15cm，高40 cm，孵化桶置于装满清水的孵化槽中，孵化槽为长方体状，长2.5m×宽0.45 m ×高0.3 m，使用孵化桶微流水孵化。孵化槽每天换水2-3次。预先备好一个平面槽，槽内悬吊和平放60目网片。当孵化桶10 % 鱼胚出膜时，将鱼胚倒在平面槽的网片上继续孵化。

2.4 亲鱼性腺发育、怀卵量及生长指标的测定

泥鳅亲鱼取自24月龄5尾，测定全长和体质量。对测定鱼体进行解剖，称量性腺质重，取性腺中段1 g，放在培养皿内计数，计算总怀卵量。

2.5 催产鱼存活率、受精率、孵化率统计方法

催产24 h将亲鱼移出产卵箱后，检查、记录产卵雌鱼尾数，计算催产率；在鱼胚发育至原肠期之前，大约孵化时间8 h, 从孵化桶中选3个点抽样300粒鱼卵，检查鱼卵受精率；在鱼胚发育 28h（出膜前2h）、30h (10% 鱼胚出膜)、35h（ 50%鱼胚出膜），抽样检查300粒鱼胚，记录死亡鱼胚数；亲鱼产卵后移至暂养池，记录7d内存活数，统计催产亲鱼存活率。

催产率( %)=产卵鱼数/催产鱼数X100

受精率( %) =受精卵数/样本卵数× 100

孵化率( %) =出苗数/样本受精卵数× 100

3.结果

3.1 泥鳅生长及性腺发育

见表1，6月龄泥鳅性腺已出现分化，雌鳅性腺重1g左右。11月龄雌鳅体质重13.20±1.79 g, 性腺重1.13±0.78 g。 24月龄性成熟雌鳅，体质重43.10±13.1 g, 性腺重6.06±3.45 g, 成熟系数 0.02 ，怀卵量大约2.0-3.0 万粒；雄鳅体质重26.90±5.10 g，性腺重0.08±0.03 g, 成熟系数 0.003。

3.2 人工催产、自然受精及鱼苗孵化情况

表2显示，在平均水温 24-26 ℃ ，雌雄鱼比例1：1.3，催产药物效应时间为10-14 h ，催产率、受精率、孵化率分别为91%、 95.3%、89.9%。

此外，受精24 h后，将产后亲鱼移入暂养池，每天两次用高锰酸钾1ppm浓度消毒30分钟，连续消毒3d , 1周后检查亲鱼存活率为 90 % ，而以往实验证明，人工授精亲鱼存活率不到50 %。由此可见，采用自然受精的方法， 大大降低了产后亲鱼的死亡率。

表1. 泥鳅生长及性腺发育状况

表2. 不同药物组合对亲鱼催产效果

表3. 泥鳅的人工繁殖情况

4.小结与讨论

4.1 药物配方与同类研究技术比较

以往泥鳅催产药物的文献，很少采用三种药物同时使用，剂量与本方法也不同。多数仅用HCG和DOM，而且HCG的药量是本方法的几倍以上。例如路志鸣， 李孝珠催产药物的最佳配比组：使用2.5ugLRH-A2/尾 和0.5mgDOM/尾 ，5IUHCG 和0.5mgDOM/尾；田功太等采用 1μgLRH-LA2/尾+400 IU HCG/尾。上述方法催产，亲鱼产卵后死亡率很高，其原因可能是药物过高，对亲鱼的性腺强烈刺激，使鱼体受到严重损伤。此外，泥鳅体表无鳞，人工受精时，体表受伤，产后皮肤感染致死。反之，本试验剂量为4μgLRH-LA2/Kg+400 IU HCG/ Kg+2.5mgDOM/Kg，催产率为91%以上，产后亲鱼成活率90%。研究表明，泥鳅的人工繁殖中，采用3种催产药物，低剂量注射，是保护亲鱼和获得高催产率的较好方法。

4.2 采用反冲式流水孵化方式，提高鱼苗孵化率的生产意义

本试验利用反冲式孵化桶孵化泥鳅，可人为控制水流速，操作方便；在孵化过程中，根据鱼胚（比重大）和杂物碎片、卵皮（比重轻）比重不同，死卵等异物及时流出孵化桶，保持桶内的活卵不被水霉菌等感染，从而大大提高了鱼卵的孵化率。此种孵化方式在生产中应用，完善了人工繁殖技术 ，必将促进泥鳅苗种的规模化扩繁。

4.3 雌雄鱼数量的性比适宜，对自然产卵、受精率的影响

小型鱼类不易进行人工授精，尤其是泥鳅，体表无鳞，人工授精后，产后亲鱼大部分死亡。有关泥鳅人工授精的亲鱼死亡率情况未见报道。作者以往人工授精试验表明，亲鱼存活率不到50%，与本文泥鳅自然授精亲鱼存活率达91%相比，说明泥鳅自然产卵受精好于人工授精。此外，泥鳅雄性个体小，雌雄配组比例按1:1 会降低受精率，根据3年试验结果，本文提出了♀：♂比例为1.1.3最佳配比， 从而保证了小型鱼类产卵、受精率。

（略）

江苏省农业科技自主创新资金项目： （CX（15）1014）；江苏省水产三新工程项目（Y2013-36）

刘俊得（1965-），男，天津宁河县人，助理工程师，主要从事水产养殖研究，E-mail：shuichanke@163.com

★通讯作者：蔺玉华（1950-），女，山东潍坊人，研究员，主要从事鱼类生理和毒理研究。E-mail:linyuhua50@sohu.com