王小婷黄 锁徐兆师李连城马有志陈 明,*闵东红

1西北农林科技大学农学院 /旱区作物逆境生物学国家重点实验室,陕西杨凌 712100;2中国农业科学院作物科学研究所 /农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程 /农业部麦类生物学与作物遗传育种重点实验室,北京100081

豌豆终止子rbc-T在转基因小麦研究中的应用

王小婷1,2黄 锁2徐兆师2李连城2马有志2陈 明2,*闵东红1,*

1西北农林科技大学农学院 /旱区作物逆境生物学国家重点实验室,陕西杨凌 712100;2中国农业科学院作物科学研究所 /农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程 /农业部麦类生物学与作物遗传育种重点实验室,北京100081

目前常用的转基因载体元件大多为真菌或细菌来源,引发对转基因食品安全性的担忧。本研究克隆了豌豆终止子rbc-T,并用其替换农杆菌终止子nos-T构建转化载体,利用基因枪法将携带Ubi启动子、GUS基因和终止子rbc-T组成的最小表达框片段转化普通小麦,同时以带有nos-T终止子的载体为对照,经过PCR检测筛选获得T2代稳定遗传的转基因小麦株系。GUS组织化学染色及酶活定量分析结果表明,带有nos-T及rbc-T的转基因小麦中均能检测到GUS基因不同程度的表达。因此认为,豌豆终止子rbc-T可以代替农杆菌终止子nos-T用于小麦的转基因研究。

胭脂碱合酶终止子(nos-T);豌豆终止子(rbc-T);转基因小麦;GUS报告基因

终止子是给予RNA聚合酶转录终止信号的特殊DNA序列,对于基因的表达调控具有重要作用。目前,植物转化载体所使用的终止子主要是一些通用终止子,常用的载体元件(如终止子、启动子等)大多为真菌或细菌来源[1]。……