李思聪，袁定胜，杨锐，王斌，李金良，李旭廷*

(1.四川省畜牧科学研究院兽药研究所，成都 610066；2.动物遗传育种四川省重点实验室，成都610066)



HPLC法同时测定大鼠血浆中3种CYP 450探针药物的浓度

李思聪1,2，袁定胜1,2，杨锐1,2，王斌1,2，李金良1,2，李旭廷1,2*

(1.四川省畜牧科学研究院兽药研究所，成都 610066；2.动物遗传育种四川省重点实验室，成都610066)

建立了同时测定大鼠血浆中3种细胞色素P450(CYP450)亚型酶( CYP1A2、CYP2C9、CYP3A4)活性的Cocktail探针药物的高效液相色谱(HPLC)检测方法。分别取非那西丁，咪达唑仑和甲苯磺丁脲三种探针药物，制成混合探针溶液，用一种提取溶剂系统对3种探针药物同时提取，并用高效液相色谱法同时测定3种探针药物的血药浓度，并对其进行专属性、线性范围及检测限、精密度、回收率、稳定性的验证。色谱条件选用Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相为甲醇-50 mM磷酸盐缓冲对(45∶55，pH 3.2)；检测波长230 nm；流速1.0 mL/min；柱温35 ℃。结果表明：非那西丁、咪达唑仑、甲苯磺丁脲的线性范围分别为0.10～10.0 μg/mL(r=0.9993)，0.05～5.0 μg/mL(r=0.9999)，0.10～50.0 μg/mL(r=0.9991)；方法回收率分别为79.28%～87.91%，76.43%～85.36%，82.79%～90.61%。该HPLC检测方法快捷，准确，灵敏度高，可以在同一次试验中，同时测定大鼠血浆中3种CYP450亚酶探针药物(非那西丁，甲苯磺丁脲，咪达唑仑)的浓度，各探针药物的吸收峰分离完全，无干扰，可用于开展某些受试药物对大鼠CYP450的3个主要亚型酶(CYP1A2，CYP2C9，CYP3A4)调控作用的相关研究，从而为相关肝药酶代谢研究提供方法学参考。

细胞色素P450；高效液相色谱法；非那西丁；甲苯磺丁脲；咪达唑仑

细胞色素P450(CYP450)是药物代谢过程中的关键酶，是一个具有大量底物特异性的同工酶大家族，负责生物体内绝大多数外源性化合物的生物转化[1-2]，可代谢大约25万种外源性物质[3]。……