付双彬，李 慧，赵 健，符学军，朱松林，张金凤

(1 林木育种国家工程实验室/林木花卉遗传育种教育部重点实验室/国家林业局树木花卉育种生物工程重点开放实验室/北京林业大学 生物科学与技术学院，北京100083；2 山西吕梁山国有林管理局 国家油松良种基地，山西 临汾 041300)

油松胚性愈伤组织培养中褐化因素研究及增殖培养基的优化

付双彬1，李 慧1，赵 健1，符学军2，朱松林2，张金凤1

(1 林木育种国家工程实验室/林木花卉遗传育种教育部重点实验室/国家林业局树木花卉育种生物工程重点开放实验室/北京林业大学 生物科学与技术学院，北京100083；2 山西吕梁山国有林管理局 国家油松良种基地，山西 临汾 041300)

【目的】调查油松Pinus tabulaeformis胚性愈伤组织增殖培养阶段不同因素对于褐化产生的影响，并结合增殖率对培养基进行调整优化以降低褐化率，提高利用率。【方法】以3个年份的9个细胞系的油松胚性愈伤组织为材料，利用单因素试验设计对放置不同数量愈伤块、pH、植物凝胶含量、糖种类和含量以及培养时间的褐化率和增殖率进行测定计算。采用正交试验选出最佳培养条件。【结果】单因素试验结果表明，褐化率在不同基因型间差异显著，且与增殖继代年龄显著正相关；在培养皿中放置6～7块愈伤组织、pH 5.8～6.0、培养基中添加2.0～3.0 g·L–1植物凝胶、添加10 g·L–1蔗糖能保证较低的褐化率和较高的增殖率，且蔗糖优于葡萄糖和麦芽糖。【结论】结合正交设计，90 mm培养皿中放置7块愈伤组织，培养基中添加2.5 g·L–1植物凝胶、10 g·L–1蔗糖，调节pH为5.9时，褐化率、增殖率和利用率最理想。……