猪流行性腹泻病毒与圆环病毒2型复合PCR方法的建立
2017-08-07龚双燕李小璟陈瑛琪李雨濛徐逸飞徐志文
龚双燕,李小璟,陈瑛琪,蔡 瑶,李雨濛,徐逸飞,朱 玲,b,徐志文,b,*
(四川农业大学 a.动物医学院; b.动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川 成都 611130)
猪流行性腹泻病毒与圆环病毒2型复合PCR方法的建立
龚双燕a,李小璟a,陈瑛琪a,蔡 瑶a,李雨濛a,徐逸飞a,朱 玲a,b,徐志文a,b,*
(四川农业大学 a.动物医学院; b.动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川 成都 611130)
为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪圆环病毒2型(PCV2)在腹泻仔猪中的感染状况,建立一种能同时检测 PEDV与PCV2混合感染的复合PCR方法。根据GenBank已发表的PEDV、PCV2的基因序列,选择保守区域分别设计、合成1对特异性引物,扩增目的片段分别为530和278 bp。经反应条件优化,建立了特异性检测PEDV、PCV2的复合PCR方法。应用本试验所建复合PCR方法,对2016年4—8月采自四川省乐山、宜宾、广元和遂宁等地区的67份腹泻仔猪样品(肠系膜淋巴结、肠道黏膜及其内容物混合)进行检测。结果显示:PEDV、PCV2单一感染阳性率分别为34.33%、73.13%;PEDV+PCV2复合感染率为16.42%。经与特异性检测PCV2的PCR法和PEDV的RT-PCR法检测结果进行比较分析,符合率均为100%。
流行性腹泻病毒;圆环病毒2型;复合PCR
猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)会引发以呕吐、腹泻和脱水为特征的急性、接触性、高度传染性猪消化道疾病。近年,猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea, PED)在全球范围暴发流行,表现为高发病率和7 d以内新生仔猪感染后高死亡率,给我国乃至世界养猪业造成了严重损失[1]。猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2, PCV2)感染可引起断奶猪多系统衰竭综合征、猪皮炎与肾炎综合征、猪呼吸道综合征等多种病型[2-4]。该病毒因可侵害感染猪免疫系统引起免疫抑制,降低机体抵抗力[5-6],导致继发、并发其他病原而表现为临床混合感染[7]。……
