李 林，刘拂晓，樊晓旭，李金明，邹艳丽，刘 珊，包静月，吴晓东，王志亮

（中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛 266032）

非洲猪瘟病毒实时荧光RPA快速检测方法的建立

李 林，刘拂晓，樊晓旭，李金明，邹艳丽，刘 珊，包静月，吴晓东，王志亮

（中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛 266032）

非洲猪瘟是一种跨境动物疫病，对世界养猪业危害严重。目前，该病的流行范围越来越广。为防止该病传入我国，当前急需建立快速、简便、可靠的检测方法。本研究通过分析非洲猪瘟病毒B646L基因保守区域，设计并合成了特异性引物和exo探针，建立了检测非洲猪瘟病毒的实时荧光RPA方法。利用该方法可在20 min内完成检测过程，最低可检测到16拷贝/反应；与猪的其他常见病原核酸无交叉反应；与荧光PCR方法具有相似的灵敏度和特异性；利用该方法对100份国内临床样品进行检测，结果均为阴性。本研究所建立的非洲猪瘟病毒实时荧光RPA检测方法具有简单、快速、敏感性高、特异性强的优点，在临床鉴别诊断、检验检疫和病原监测等方面具有广泛的应用价值。

非洲猪瘟；非洲猪瘟病毒；实时荧光RPA；实时荧光PCR

非洲猪瘟（African swine fever，ASF）是猪的一种急性、热性、高度接触性传染病，能感染所有品种和年龄的猪，引起一系列综合症状，临床上以高热、食欲废绝、皮肤和内脏器官出血、高死亡率为特征。该病属于世界动物卫生组织（OIE）的法定报告动物疫病，在我国被列为一类动物疫病。ASF的病原为非洲猪瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）。该病毒为双链DNA，是非洲猪瘟病毒科（Asfarviridae）的唯一成员[1]。……