樊晓旭，哈登楚日亚，2，王英丽，王 姣，刘春菊，迟田英，赵永刚，张志诚，吴晓东，王志亮

（1. 中国动物卫生与流行病学中心，国家外来病研究中心，山东青岛 266032；2. 内蒙古农业大学兽医学院，内蒙古呼和浩特 010018；3. 常州市动物疫病预防控制中心，江苏常州 213002）

塞尼卡谷病毒重组酶聚合酶扩增技术（RPA）实时荧光检测方法的建立

樊晓旭1，哈登楚日亚1，2，王英丽1，王 姣3，刘春菊1，迟田英1，赵永刚1，张志诚1，吴晓东1，王志亮1

（1. 中国动物卫生与流行病学中心，国家外来病研究中心，山东青岛 266032；2. 内蒙古农业大学兽医学院，内蒙古呼和浩特 010018；3. 常州市动物疫病预防控制中心，江苏常州 213002）

塞尼卡谷病毒（Seneca valley virus，SVV）可感染猪，引起类似口蹄疫病毒感染造成的水疱性病变，新生仔猪病死率达30%～70%。本研究利用重组酶聚合酶扩增技术（RPA），针对SVV 3D基因设计了引物和探针，并进行筛选、反应条件优化以及敏感性、特异性和重复性试验，建立了实时荧光RPA方法。结果显示，本方法在40 ℃、10 min内检测的最低浓度为28拷贝/µL；与口蹄疫病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒无交叉反应；通过3次重复试验检测2.8×106～2.8×101拷贝/μL的6个稀释度样品，在荧光强度达1 500 mV所需时间变异系数范围在2.44%～14.95%。该等温、快速扩增方法为猪群出现水疱性疾病的鉴别诊断提供了技术支持，对及时采取适当防控措施具有重要意义。

塞尼卡谷病毒；实时；荧光；重组酶聚合酶扩增

塞尼卡谷病毒（Seneca Valley virus，SVV），又称为Senecavirus A（SVA），是猪原发性疱疹病（Swine idiopathic vesicular disease，SIVD）的主要病原。SVV感染猪群后，尽管不会造成与口蹄疫病毒相同的较大政治、经济损失，但所引起的水疱性病变，与口蹄疫、猪水泡病、水泡性口炎、猪水疱疹等造成的病变相似，给临床鉴别诊断造成了一定的困难[1]。……