丹参素拮抗氧化应激所致骨质疏松并通过PI3k/Akt通路减少成骨细胞的凋亡
2017-08-06王秉义潘剑
王秉义 潘剑
兰州大学第二医院骨科,甘肃 兰州 730030
近年来,骨质疏松发病率也呈增加的趋势,骨质疏松已经成为一个世界性的公共卫生问题[1]。氧化应激作为骨质疏松的一个危险因素己受到高度重视,各种类型的骨质疏松的发病过程中都伴随氧化应激水平的升高和凋亡的发生[2,3]。因此,具有抗氧化活性的物质有可能是防治骨质疏松的新靶点[4]。讫今为止,研究最多的天然抗氧化治疗骨质疏松的药物是白藜芦醇[5]。白藜芦醇能够清除细胞内的ROS,减缓衰老进程并可维持骨密度。丹参中丹参素等水溶性酚酸类成分是天然抗氧化有效成分,结构和白藜芦醇极其相似,含有多个酚经基,可以提供活性氧阻止脂质过氧化反应,能提高机体SOD活性,清除ROS,减少ROS对机体细胞造成的损害,改善细胞缺血缺氧,可预防心脑血管疾病[6]。本文探究丹参素拮抗氧化应激造成成骨细胞凋亡的作用,为骨质疏松的治疗提供新的思路。
1 材料和方法
1.1 实验动物
4月龄清洁级SD大鼠60只,雌性,体重为(240±10)g,置于安静、恒温恒湿、无强光刺激的环境中饲养。大鼠由兰州大学实验动物中心提供,实验动物生产许可证号:SCXK(甘)2013-0006。
1.2 主要试剂与设备
醋酸拨尼松(批号060328),广东华南药业;丹参素(纯度>85%,批号20140816),鸿生生物;白藜芦醇(纯度>98%,批号20140908),鸿生生物;一抗(Bax、AIF、cyto-C、pAkt及β-action),美国Santa Cruz公司;PI3K抑制剂Ly294002(批号:K1047),Cayman Chemical公司;胰酶、山羊抗兔IgG-HRP、Western免疫印迹的化学发光检测试剂盒,购自美国Sigma公司;α-MEM培养基购自GIBco公司。双能X线骨密度检测仪(Lunar美国),Western blot发光与凝胶成像系统,美国ALPHA公司;XY……
