张 静 陶志国 许保海

(1 北京积水潭医院中药房,北京,100035; 2 北京市药品检验所,北京,102206)

金匮肾气丸辅助治疗对支气管哮喘缓解期患者免疫功能的影响

张 静1陶志国2许保海1

(1 北京积水潭医院中药房,北京,100035; 2 北京市药品检验所,北京,102206)

目的:探讨金匮肾气丸辅助治疗对支气管哮喘缓解期患者免疫功能的影响。方法:选取2013年7月至2016年4月在北京积水潭医院接受治疗的支气管哮喘缓解期患者110例,回顾治疗方案并分为接受单纯西医治疗的对照组58例、接受金匮肾气丸辅助西医治疗的观察组52例。治疗前后,比较2组患者的外周血Th17/Treg细胞比例,血清中Th1/Th2细胞因子及体液免疫指标含量的差异。结果:治疗前,2组患者外周血中Th17/Treg细胞比例,血清中Th1/Th2细胞因子及体液免疫指标含量的差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,观察组患者外周血中Th17细胞比例、Th17/Treg比值低于对照组患者,Treg细胞比例高于对照组患者;血清中白细胞介素-2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)的含量高于对照组患者,白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)的含量低于对照组患者;血清中体液免疫指标免疫球蛋白E(IgE)、补体C3的含量低于对照组患者(P<0.05)。结论:金匮肾气丸辅助治疗可优化成人支气管哮喘缓解期患者的细胞免疫、体液免疫功能,具有积极的临床意义。

支气管哮喘缓解期;金匮肾气丸;免疫功能

支气管哮喘是临床最常见的呼吸系统疾患之一,由多种炎性反应细胞及免疫细胞共同参与病情进展,缓解期患者临床症状体征均消失,但仍存在急性发作风险,需积极维持患者的内环境稳态[1-2]。目前西医治疗缓解期支气管哮喘效果肯定但存在局限性,中医学对哮喘的认识已有数千年历史,较多学者推荐加入中医制剂治疗以扩大疗效。“未发以扶正气为主,既发以攻邪气为急”是目前中医治疗支气管哮喘的原则,既往研究证实补肾法可较好控制患者气道炎性反应[3]。金匮肾气丸是具有温补肾阳,化气行水作用的中成药,适用于临床支气管哮喘患者的治疗[4]。本次研究在常规西医治疗基础上,将金匮肾气丸作为辅助用药加入临床成人支气管哮喘缓解期患者的治疗,探讨联合治疗对患者细胞免疫、体液免疫等影响,现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2013年7月至2016年4月在北京积水潭医院接受治疗的支气管哮喘缓解期患者110例,回顾治疗过程,将患者分为:接受单纯西医治疗的对照组58例;接受金匮肾气丸辅助西医治疗的观察组52例。对照组患者中男30例,女28例,年龄22～48岁,平均年龄(32.47±9.26)岁,哮喘病程9～23年,平均病程(15.38±5.23)年;观察组患者中男27例,女25例,年龄19～49岁,平均年龄(31.53±9.87)岁,哮喘病程8～21年,平均病程(14.95±5.09)年。2组患者的性别、年龄、哮喘病程等方面比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。医院伦理委员会讨论、批准此次研究,所有患者本人了解研究过程并签署知情同意书。

1.2 诊断标准 1)经过治疗或者未经治疗,患者的哮喘症状体征消失;2)肺功能检查各项指标恢复至急性发作前水平;3)上述病情稳定持续时间≥3个月。

1.3 纳入标准 1)年龄≥18周岁;2)既往未接受中医治疗;3)全程配合治疗及相关检查。

1.4 排除标准 1)合并急慢性鼻窦炎、慢性阻塞性肺疾病、急性肺炎等其他上下呼吸道疾患;2)合并严重自身免疫性疾病;3)合并全身感染性疾病;4)合并严重心肝肾功能不全。

1.5 治疗方法 对照组患者接受成人支气管哮喘缓解期常规抗炎、解痉治疗。观察组在常规西医治疗基础上,加入金匮肾气丸辅助治疗,具体如下:熟地黄20 g、山药15 g、黄芪15 g、山茱萸15 g、泽泻10 g、茯苓10 g、半夏10 g,沉香8 g、肉桂8 g、五味子8 g,加水300 mL煎煮共取汁200 mL,口服100 mL/次,2次/d,持续治疗3个月。

1.6 观察指标 对2组患者治疗前、治疗后免疫功能进行观察比较,均抽取2组患者的晨起空腹肘静脉血3.0 mL,经枸橼酸钠(四川南格尔生物科技有限公司生产,国药准字H20058912)抗凝处理。其中1.0 mL直接采用流式细胞仪(美国Merck Millipore公司,型号guava easyCyte 8)测定其中Th17细胞、Treg细胞比例,计算Th17/Treg比值。另2.0 mL经2 500 r/min离心10 min取上层血清,低温离心机购自孚光精仪(中国)有限公司,货号为MAH66Q,血清冻存于-70 ℃深低温环境下备用。采用酶联免疫吸附法测定血清中Th1细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ),Th2细胞因子白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)的含量,酶联免疫试剂盒购自美国Roche公司,货号分别为MDJ-397、LSK-254、MSY-635、AGS-981。采用全自动化学发光免疫分析仪(美国贝克曼库尔特公司,型号UniCel DxI800)测定血清中体液免疫指标免疫球蛋白E(IgE)、补体C3的含量。

2 结果

2.1 Th17/Treg细胞 治疗前,2组患者外周血中Th17、Treg细胞比例,Th17/Treg比值水平差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组患者外周血中Th17细胞比例、Th17/Treg比值低于治疗前,Treg细胞比例高于治疗前,且观察组患者的上述指标变化程度大于对照组患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

2.2 Th1/Th2细胞因子 治疗前,2组患者血清中Th1细胞因子IL-2、IFN-γ,Th2细胞因子IL-4、IL-5含量的差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组患者血清中IL-2、IFN-γ的含量高于治疗前,IL-4、IL-5的含量低于治疗前,且观察组患者的上述指标变化程度大于对照组患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.3 体液免疫 治疗前,2组患者血清中体液免疫指标IgE、C3含量的差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组患者血清中IgE、C3的含量低于治疗前,且观察组患者的上述指标变化程度大于对照组患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表1 2组治疗前后外周血中Th17/Treg细胞比例

注：与组内治疗前比较,*P<0.05;与对照组治疗后比较,△P<0.05。

表2 2组治疗前后血清中Th1/Th2细胞因子含量的比较±s)

注：与组内治疗前比较,*P<0.05;与对照组治疗后比较,△P<0.05。

表3 2组治疗前后血清中体液免疫指标含量的比较±s)

注：与组内治疗前比较,*P<0.05;与对照组治疗后比较,△P<0.05。

3 讨论

支气管哮喘属于中医“喘病”“喘证”范畴,病机在脏腑功能失调、宿痰伏肺。遇感邪引触致痰阻气道、肺失肃降。根据“缓则治本”,缓解期是支气管哮喘患者治疗的最佳时期,需采取积极的治疗手段调节机体内环境平衡、抑制哮喘急性发作[5]。中西医结合治疗是目前缓解期支气管哮喘治疗的趋势,在常规西医治疗的基础上加入针对性中药制剂以均衡脏腑功能,发挥扶正治本的作用。肾是先天之本、藏主纳气,肾精亏损则导致摄纳无权、动则气促,故补肾制剂是缓解期支气管哮喘治疗的可靠方式[6]。金匮肾气丸是由地黄、山药、茯苓、牡丹皮、山茱萸、牛膝、泽泻等多味中药制成的综合制剂,诸多研究证实该药具有温补肾阳,化气行水的作用,故本次研究将其作为辅助用药用于成人支气管哮喘缓解期的治疗。

支气管哮喘发病机制复杂,经典理论认为T细胞介导的免疫失衡在其发生发展中扮演重要角色。研究证实系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等自身免疫性疾患中均存在Th17细胞、Treg细胞及其代表性细胞因子比例失衡,是疾病进展的重要原因之一[7-8]。Th17细胞通过分泌IL-17进而诱导中性粒细胞在气管局部的聚集、增加气道高反应性,是哮喘患者气道慢性炎性反应发生发展的核心机制之一。Treg细胞负责调节T细胞活化,避免机体因过度免疫而造成损伤,对机体免疫功能具有负调节作用,且目前较多研究已经发现在哮喘重症患者中存在Treg细胞数量及功能抑制[9-10]。本次研究首先检测2组患者外周血中Th17/Treg细胞比例,发现:2组患者治疗后外周血中Th17细胞比例均下降,Treg细胞比例均上升,且Th17/Treg比值下降,说明2种治疗方案均可优化Th17/Treg细胞免疫。同时,观察组患者治疗后Th17细胞比例较对照组低,Treg细胞比例较对照组高,且Th17/Treg比值较对照组下降,证实金匮肾气丸辅助治疗有助于抑制过度的细胞免疫,且减轻由此产生的机体损伤。

Th1/Th2细胞免疫失衡已经是支气管哮喘的公认发病机制,生理状态下机体处于Th1细胞优势状态,而在动物实验中证实:哮喘大鼠循环血中Th1细胞及其细胞因子的效应减弱,Th2细胞及其因子的效应增强,Th1/Th2的极化出现偏移,故检测患者的Th1/Th2失衡状态是判断哮喘病情、评估临床治疗效果的可靠手段[11-13]。IL-2、IFN-γ是由Th1细胞分泌的因子,IL-4、IL-5则由Th2细胞分泌,本次研究比较2组患者血清中上述细胞因子含量的差异,发现:2组患者治疗后Th1细胞因子含量均较治疗前增加,Th2细胞因子含量较治疗前下降,且观察组患者血清中上述细胞因子含量的改变幅度更大,说明加入金匮肾气丸辅助治疗可更为有效的逆转支气管哮喘缓解期患者的Th1/Th2失衡,有助于患者免疫均衡状态的实现。

体液免疫失衡也参与支气管哮喘的进展,既往研究证实哮喘患者普遍存在IgE含量增加,IgE与致敏原结合后刺激肥大细胞、嗜碱性粒细胞释放组胺,从而引发过敏反应及哮喘急性发作[14-15]。补体系统的异常激活是支气管哮喘气道炎性反应发生的另一重要原因,补体C3被裂解为过敏毒素C3a后,可发挥强效促炎作用,通过激活肥大细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞而引起气道平滑肌收缩[16]。本次研究比较2组患者的血清IgE、C3含量,发现:2组患者治疗后IgE、C3的含量均低于治疗前,且观察组患者IgE、C3的含量较对照组低,说明金匮肾气丸辅助治疗可进一步降低体液免疫系统中IgE、C3的异常激活,并减轻由此产生的气道炎性反应、缓解哮喘病情并抑制其急性发作,这也是金匮肾气丸发挥支气管哮喘治疗的重要机制之一。

综上所述,得出以下结论:金匮肾气丸辅助治疗可有效优化支气管哮喘缓解期患者的细胞免疫及体液免疫功能,有助于病情优化及急性发作的抑制,是一种高效可行的全新治疗方案,值得在日后临床实践中推广应用。

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(2017-05-22收稿 责任编辑：王明)

Influence of Jinkuishenqiwan Adjuvant Therapy on Immune Function in Adult Bronchial Asthma in Remission Stage Patients

Zhang Jing1,Tao Zhiguo2,Xu Baohai1

(1BeijingJishuitanHospitalTCMPharmacy,Beijing100035,China; 2TheDrugInspectionofBeijing,Beijing102206,China)

Objective:To study the influence of Jinkuishenqiwan adjuvant therapy on immune function in adult bronchial asthma in remission stage patients.Methods:One hundred and ten cases of adult bronchial asthma in remission stage patients in our hospital during July 2013 to April 2016 were chosen as research subject,treatment methods were reviewed and all patients were divided into control group(n=58)underwent normal western medicine treatment only,observation group(n=52)underwent Jinkuishenqiwan adjuvant therapy plus normal western medicine treatment.Before and after treatment,peripheral blood Th17/Treg cell ratio,serum Th1/Th2 cytokines and humoral immune indexes between two groups were compared.Results:Before treatment,there were no significant difference between two groups about peripheral blood Th17/Treg cell ratio,serum Th1/Th2 cytokines and humoral immune indexes(P>0.05).After treatment,Th17 cells and the ratio of Th17/Treg in observation group in peripheral blood were lower than those in control group,Treg cells was higher than that in control group; serum contents of IL-2,IFN-γ were higher than those in control group,IL-4,IL-5 were lower than those in control group;serum contents of humoral immunity indexes such as IgE、C3 were lower than that in control group(P<0.05).Conclusion:Jinkuishenqiwan adjuvant therapy can relieve the cellular immunity,humoral immune function in patients with optimization of adult bronchial asthma,has positive clinical significance.

Bronchial asthma in remission stage;Jinkuishenqiwan;Immune function

国家自然科学基金青年科学基金项目(31601078)

R256.12

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2017.07.022