孙龙，孙洪计，张瑞东，汪涣，晏鹏，张方，吴荣，吴孝兵

（安徽师范大学生命科学学院遗传保护生物学教研室，芜湖，241000）

甲状腺激素受体在扬子鳄卵巢中的免疫组织化学定位和不同繁殖时期的m RNA表达水平变化检测

孙龙，孙洪计，张瑞东，汪涣，晏鹏，张方，吴荣，吴孝兵*

（安徽师范大学生命科学学院遗传保护生物学教研室，芜湖，241000）

目的研究扬子鳄甲状腺激素受体（thyroid hormone receptor，TR）基因的系统进化关系和在卵巢组织中的定位，分析成年扬子鳄在不同繁殖活动期卵巢组织中甲状腺激素受体的动态变化规律。方法通过Clustal W软件对扬子鳄和其它脊椎动物TRs氨基酸序列进行序列比对，使用MEGA 6.0软件构建NJ系统发育树；应用qRT-PCR方法检测TRα和TRβ mRNA在不同繁殖时期卵巢组织中的表达水平差异；应用免疫组织化学法对扬子鳄卵巢卵泡中TR进行组织定位。结果系统发育分析显示扬子鳄与鸟类亲缘关系较近；扬子鳄卵巢中TR的mRNA表达水平在繁殖期最高，在繁殖前期和繁殖后期相对较低；免疫组织化学染色显示，TR阳性反应主要位于卵泡的颗粒层细胞、卵泡膜、卵母细胞质和卵母细胞核中，其中颗粒层细胞阳性反应最明显。结论TR基因的进化时间较早，因此序列保守性较高； TRα和TRβ对扬子鳄卵泡发育成熟具有重要作用；颗粒层细胞是TRs的功能作用主要位点。

扬子鳄；甲状腺激素受体；卵巢

在脊椎动物中，甲状腺激素有三碘甲状腺原氨酸（T3）和甲状腺素（T4）两种，T3是甲状腺激素活性最强的形式，由非甲状腺组织中的T4外环脱碘产生[1]。……