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水/有机溶剂双相体系中色氨酸合成酶酶法合成2-甲基-L-色氨酸

2017-07-25徐礼生高贵珍曹稳根张兴桃焦庆才

食品与生物技术学报 2017年5期
关键词:体系

徐礼生, 高贵珍, 曹稳根, 赵 亮,张兴桃, 焦庆才,陈 军, 宋 曼

(1.宿州学院 生物与食品工程学院,安徽 宿州 234000;2.南京大学 医药生物技术国家重点实验室,江苏 南京210093)

水/有机溶剂双相体系中色氨酸合成酶酶法合成2-甲基-L-色氨酸

徐礼生1,2, 高贵珍1, 曹稳根1, 赵 亮1,张兴桃1, 焦庆才2,陈 军1, 宋 曼1

(1.宿州学院 生物与食品工程学院,安徽 宿州 234000;2.南京大学 医药生物技术国家重点实验室,江苏 南京210093)

本文作者研究了水/有机溶剂双相体系中利用色氨酸合成酶催化L-丝氨酸和2-甲基吲哚合成2-甲基-L-色氨酸,考察了有机溶剂、有机溶剂体积分数、pH、反应温度、表面活性剂、金属离子和底物浓度对色氨酸合成酶催化合成2-甲基-L-色氨酸的影响。有机溶剂包括二甲苯、甲苯、乙酸乙酯、乙酸丁酯和辛醇,表面活性剂包括吐温80、聚乙二醇辛基苯基醚(OP)、CTAB和Trion X-100,金属离子包括Mg2+、Ca2+、Cu2+、Co2+和Zn2+。结果表明,酶法最佳转化条件为:有机相溶剂为甲苯,甲苯体积分数为2%,反应温度为40℃,水相pH为8,底物L-丝氨酸浓度为150 mmol/L,表面活性剂Trion X-100质量分数为2%,金属离子Ca2+浓度为0.1 mmol/L,色氨酸合成酶酶促反应5 h,2-甲基-L-色氨酸的质量浓度为21.17 g/L。重组大肠杆菌DM206可作为2-甲基-L-色氨酸生产菌,具有较好的2-甲基-L-色氨酸生产潜力。

色氨酸合成酶;2-甲基-L-色氨酸;L-丝氨酸;2-甲基吲哚

色氨酸在生物体非核糖体多肽和生物碱合成中具有重要作用[1],一些色氨酸衍生物同样具有重要作用,例如5-羟基色氨酸[2-3],7-氯-色氨酸[4]和2-甲基-L-色氨酸[5]。2-甲基-L-色氨酸是抗菌素硫链丝菌肽合成中重要的中间体[6],含有2-甲基色氨酸的寡肽化合物可以使亲躯体细胞(somatotrope)释放生长素,哺乳动物服用能诱导生长激素释放的化合物之后,动物体内的生长素提高,使动物生长速度加快[5]。……

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