赵娟莹，刘佳明，冯志娟，陈明，周永斌，陈隽，徐兆师，郭长虹

（1哈尔滨师范大学生命科学与技术学院/黑龙江省分子细胞遗传与遗传育种重点实验室，哈尔滨 150025；2中国农业科学院作物科学研究所/国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程/农业部麦类生物学与遗传育种重点实验室，北京 100081）

大豆锌指转录因子GmDi19-5对高温的响应及互作蛋白的筛选

赵娟莹1,2，刘佳明2，冯志娟2，陈明2，周永斌2，陈隽2，徐兆师2，郭长虹1

（1哈尔滨师范大学生命科学与技术学院/黑龙江省分子细胞遗传与遗传育种重点实验室，哈尔滨 150025；2中国农业科学院作物科学研究所/国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程/农业部麦类生物学与遗传育种重点实验室，北京 100081）

【目的】高温胁迫已经成为威胁作物生长发育的主要非生物胁迫因素之一，转录因子在植物非生物胁迫响应中起着重要作用。通过对大豆锌指转录因子基因GmDi19-5在高温胁迫下的响应和功能鉴定，以及利用酵母双杂交技术从大豆cDNA文库筛选与其互作的候选蛋白，研究GmDi19-5对高温胁迫的响应机制。【方法】以大豆cDNA为模板，利用实时荧光定量PCR检测GmDi19-5在高温处理不同时间段的表达模式；通过PlantCARE和PLACE数据库预测GmDi19-5启动子元件，并对GmDi19-5启动子转基因拟南芥在高温处理下进行的组织化学染色，分析GmDi19-5启动子在高温胁迫下的活性；构建pGBKT7-GmDi19-5诱饵载体，验证自激活活性；利用酵母双杂交技术，以pGBKT7-GmDi19-5为诱饵筛选大豆cDNA文库，筛选与其互作的候选蛋白；进一步用酵母双杂交系统验证GmDi19-5与候选蛋白的互作；……