杨槐，杨娜，刘智，夏勤，李林丰，崔丽娟，梁鹏，夏涌然，刘汝艺，刘禄

(遂宁市中心医院，四川 遂宁 629000)

液基细胞学检测技术在胸腔积液细胞学诊断中的应用价值

杨槐，杨娜，刘智，夏勤，李林丰，崔丽娟，梁鹏，夏涌然，刘汝艺，刘禄*

(遂宁市中心医院，四川 遂宁 629000)

目的：探讨液基细胞学检测技术在胸腔积液细胞学诊断中的应用价值。方法：选取遂宁市中心医院病理科胸腔积液细胞学标本238 例，采用液基细胞薄层涂片检测(TCT)法及传统手工细胞学涂片法进行细胞学检测，检测结果以病理活组织检查为标准，并对两种方法的检出率进行比较。结果：238 例胸腔积液标本中，传统涂片法检出73 例(30.7%)，TCT法检出97 例(40.8%)。238 例中共检出肺癌80 例，两种方法对腺癌、鳞状细胞癌、小细胞癌的检出率比较，差异均有统计学意义。结论：液基细胞学检测技术在胸腔积液细胞学诊断中具有较高的病变检出率，尤其对恶性肿瘤的检出率具有重要临床诊断价值。

液基细胞学；胸腔积液；细胞学；诊断

液基细胞薄层涂片检测(TCT)是采用滤过膜或重力沉淀原理，利用特殊制片系统制作标准化优良细胞学病理薄片的一项技术[1]。该技术是现代细胞病理学的一项重大革新，自1999年引进我国，广泛应用于妇科宫颈癌的早期筛查，是女性宫颈疾病早诊早治的重要检查方法，为宫颈癌早诊早治做出了重要贡献。近年来，该技术在非妇科方面的应用也逐渐普及。本文238 例胸腔积液标本均采用TCT法与传统手工细胞涂片法进行检测，对结果进行比较。报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2015年1月—2016年8月遂宁市中心医院病理科胸腔积液标本238 例，其中男178 例，女60 例，年龄21～76 岁，胸腔积液均进行细胞学检查并行胸膜腔穿刺活组织检查术或纤维支气管镜活组织检查术，病理诊断结果以活组织检查诊断为标准。

1.2 试剂与仪器

巴氏染色液、TCT处理液及TCT制片机均购自泰普生物科技有限公司(福州，泰普)，无水乙醇、二甲苯、甲醛溶液均购自科隆试剂有限公司(成都，科隆)。

1.3 方法

238 例胸腔积液细胞学病理薄片制作采用传统手工涂片法与TCT法同时进行取材制片。标本前期处理方法为：送检标本4 ℃静置6～8 h，弃上清液，保留液体150～200 mL。传统手工细胞涂片法：用移液管于前期处理后的标本液体中层吸取3 mL进行手工细胞涂片，保持液体均匀分布于载玻片，室温下干燥，转入75%乙醇固定4 h，进行巴氏染色，染色步骤按操作手册进行。TCT法：将前期处理后标本液体50 mL转入TCT标本处理液中，静置1 h，置涡旋振荡器5 min振荡混匀，将标本转入带有滤网的试管，以2 000 r/min离心10 min，弃上清液，加入10 mL Tris缓冲液再次振荡混匀，将混匀液体转入TCT制片机按操作进行制片，染色。

1.4 分组依据

238 例胸腔积液病变在进行细胞学病理诊断后，均行相应活组织检查，最终诊断标准依据活组织检查的组织石蜡切片为准。将胸腔积液检测结果分为良性病变和恶性病变两大类，其中良性病变分为肺炎组(A组，81 例)和肺结核组(B组，77 例)，恶性病变为肺癌组(C组，80 例)。肺癌组根据癌肿类型分为腺癌组(Ⅰ组，41 例)、鳞状细胞癌组(Ⅱ组，27 例)、小细胞癌组(Ⅲ组，12 例)。

1.5 统计学方法

采用SPSS17.0统计学软件对所得数据进行处理，计数资料采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 传统涂片法与TCT法对胸腔积液细胞学总检出率比较

传统涂片法检出73 例，检出率为30.7%，TCT法检出97 例，检出率为40.8%，两种方法比较差异有统计学意义(P<0.05)。A组与B组两种方法检出率比较差异无统计学意义(P>0.05)，C组两种方法检出率比较，差异有统计学意义(P<0.05)(见表1)。

表1 两种方法对胸腔积液细胞学总检出率比较例(%)

2.2 传统涂片法与TCT法对胸腔积液细胞学中肺癌组检出率比较

238 例研究对象中肺癌80 例，传统涂片法检出25 例，检出率为31.2%，TCT法检出43 例，检出率为53.8%，两种方法检出率比较差异有统计学意义(P<0.05)。将Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组传统涂片法与TCT法检出率进行比较，差异有统计学意义(P<0.05)(见表2)。

表2 两种方法对胸腔积液细胞学中肺癌组检出率比较

3 讨 论

3.1 胸腔积液细胞学诊断标准

3.1.1 炎症

病理学诊断胸腔积液炎症性病变的病理特征为胸腔积液细胞学涂片中可查见中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞等炎症性细胞，背景中有纤维素样渗出物及坏死细胞碎片等，常见胸膜脱落的内皮细胞，无异常肿瘤样细胞[2]。

3.1.2 结核性病变

结核性胸腔积液具有典型浑浊特点，经沉淀后胸腔积液可分层，表层为一层薄层的油脂样膜，其下为澄清渗出液及脱落细胞，底层为坏死组织碎片沉淀[3]。在细胞学片上可见大量的淋巴细胞，并可见多核巨细胞，背景较多为干酪样坏死。

3.1.3 腺癌

胸腔积液中腺癌细胞多为成团分布，癌细胞团的大小、形状不一，极性消失。癌细胞常相互重叠挤压，呈桑葚样排列，形状为卵圆形，细胞核明显，核膜厚，核染色质呈疏松颗粒样，核仁大而明显[4]。TCT法中癌细胞可呈单个分布或3～5个排列，胞浆常有分泌空泡。

3.1.4 鳞状细胞癌

胸腔积液中鳞状细胞癌多为单个散在分布，形态多样，常可出现不规则、多边形等奇异性细胞，细胞背景有较多红细胞及坏死样不定形物质，TCT法中癌细胞多均匀分散，平铺于切片上，背景清晰，核染色质呈块状或粗颗粒状，深染，有的可呈墨水滴样，分化差的可见明显核仁，部分区域癌细胞呈巢团状分布，且具有一定极性，并在一定程度上表现为鳞状上皮的排列特点[5]。

3.1.5 小细胞癌

胸腔积液中小细胞癌为恶性神经内分泌肿瘤，恶性度极高。癌细胞起源于神经内分泌细胞，体积较小，呈圆形、卵圆形或燕麦样，细胞质极少，以细胞核为主，该肿瘤细胞单个散在分布时极易与淋巴细胞相混淆，癌细胞大小约为淋巴细胞的1.5～2.0倍，核畸形明显，染色质浓集，细胞常成群出现。TCT法可收集较多量的细胞于切片上[6]，有助于较多异型性细胞的检出，并且增加癌细胞与正常淋巴细胞的对比，可大大减少漏诊及误诊率。

3.2 细胞病理学在病理学诊断中的地位

病理学由组织病理学、细胞病理学及尸检病理学三大部分组成。其中，细胞病理学是临床诊断病理学的一个重要组成部分[7]。目前，已经发展到分子生物学水平，液基细胞学检测技术的优点[8]：第一，处理系统改变了标本采集和处理的方法，能够消除标本中黏液及红细胞，使背景清晰、无污染，保持细胞完整无损，更加清楚细腻地获得了细胞核核质及核仁的三维立体结构。第二，取材标本量较大，本研究中TCT法所取标本为经过静置沉淀处理后的标本，取材量达到近200 mL，大大提高了阳性标本的检出率，降低了漏检比例。直接涂片法的阳性符合率较低及出现假阴性的原因为：第一，涂片中没有具有诊断意义的细胞或涂片质量差且厚薄不均匀。第二，过多黏液和(或)血液造成背景杂乱，干扰结果。第三，炎症细胞、上皮细胞过度重叠使具有诊断意义的细胞被遮盖，导致无法观察而影响诊断。

3.3 液基细胞学在细胞病理学的地位

液基细胞学检测技术的优势[9]：第一，能够去除影响阅片的细胞同时还能够保证有足够的细胞数量供诊断参考，并避免了直接涂片过程中所引起的细胞过度干燥造成的假象[10]。第二，自动化程序制出的薄片分布均匀，湿润固定的细胞核结构清晰易于观察。第三，每张切片的细胞较为集中排列在固定区域内，便于观察，减少因疲劳造成的漏诊情况。第四，程序化制片，具有高效率、高稳定性、高规范化等特点，保证制片的细胞的效果，避免人工涂片造成人为细胞挤压而出现肿瘤假象[11]。制片质量高，使诊断细胞病理学提高到标准化自动化的阶段，提高了非妇科细胞学诊断的准确性与可靠性。对早期发现诊断肿瘤及肿瘤防治研究具有重要意义，液基细胞学技术作为一种改良的细胞学制片技术还可以用于免疫细胞化学和分子水平的研究[12]。本研究中，238 例胸腔积液标本总检出率、肺癌组检出率及肺癌类型分型检出率比较，TCT法均优于传统涂片法，显示TCT技术在非妇科液基细胞学检测中也具有较高的应用价值。

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The value application of thin-prep cytology test in the diagnosis of pleural effusion cytology

YANG Huai，YANG Na，LIU Zhi，XIA Qin，LI Linfeng，CUI Lijuan，LIANG Peng，XIA Yongran，LIU Ruyi，LIU Lu

(Suining Central Hospital，Suining 629000，China)

Objective：To explore the value of liquid-based cytology in the diagnosis of pleural effusion cytology.Methods：All 238 cases of pleural effusion cytology were collected from Suining Central Hospital.The TCT method and traditional manual cytology smear were used for cytology.The detection results were based on pathologic biopsy and the detection rate of the two methods were compared.Results：In the 238 cases of pleural effusion，73 cases (30.7%) were detected by traditional smear，97 cases (40.8%) were detected by TCT method.In 238 cases，lung cancer in 80 cases，compared with the traditional smear detection rate，the difference was statistically significant.Conclusion：Thin-prep cytology test in the pleural effusion cytology diagnosis has higher detection rate of pathological changes，especially for malignant tumor detection rate with the clinical diagnostic value.

thin-prep cytology test；pleural effusion；cytology；diagnose

1671-8631(2017)06-0456-03

*本文通讯作者：刘禄

R561

B

2016-08-16

(本文编辑：王作利)

杨槐(1974— )，男，重庆市潼南县人，副主任医师。研究方向：细胞学病理诊断。