李旎　詹向阳　陈艳华

[摘要] 目的 分析人宫颈癌HeLa细胞核内M-CSF增高对化疗药物的影响。 方法 体外培养HeLa细胞、HeLa-M细胞以及转染M-CSF空载体HeLa-C细胞。分别使用紫杉醇和顺铂（浓度分别为0.3、3、30 μg/mL）作用48 h，采用MTT方法比较细胞的相对活性，Westen blot分析转染M-CSF对抗凋亡分子Bcl-2表达的影响。 结果 当两种化疗药物的浓度为3、30 μg/mL时，与HeLa-C细胞和HeLa细胞相比，HeLa-M细胞活性明显增高，差异有统计学意义（P<0.05）；当浓度为0.3 μg/mL时三种细胞活性无明显差异。Westen blot结果显示，转染M-CSF后能够使细胞中的抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平明显升高。 结论 人宫颈癌HeLa细胞核中的M-CSF增高可以使细胞的药抗性提高，从而抑制HeLa细胞的凋亡。

[关键词] 人宫颈癌；HeLa细胞核；M-CSF；化疗药物

[中图分类号] R73 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2017）16-0030-03

[Abstract] Objective To analyze the effect of elevated M-CSF in nuclei on the chemotherapeutic drugs of human cervical cancer HeLa cells. Methods HeLa cells， HeLa-M cells and HeLa-C transfected with M-CSF empty vector were cultured in vitro. The paclitaxel and cisplatin（concentrations were 0.3， 3， 30 μg/mL） were used for 48 h， respectively. The relative viability of the cells was compared by MTT method. The effect of transfection with M-CSF on the expression of Bcl-2 was detected by Western blot analysis. The effect of paclitaxel and cisplatin （concentration 0.3， 3， 30 μg/mL） on the expression of anti-apoptotic molecule Bcl-2 was detected by MTT method. Results The viability of HeLa-M cells was significantly higher than that of HeLa-C cells and HeLa cells when the concentration of the two chemotherapeutic drugs was 3， 30 μg/mL， and the difference was statistically significant（P<0.05）. There was no significant difference in cell viability between the three kinds of cells when the concentration was 0.3 μg/mL. The results of Western blot showed that the expression of anti-apoptotic protein Bcl-2 was significantly increased after transfection with M-CSF. Conclusion The increase of M-CSF in the nucleus of human cervical cancer HeLa cells can improve the drug resistance of the cells and inhibit the apoptosis of HeLa cells.

[Key words] Human cervical cancer； HeLa nucleus； M-CSF； Chemotherapy drugs

M-CSF即巨噬細胞集落刺激因子，简称集落刺激因子[1]，主要是由链间二硫键所形成的同源二聚体糖蛋白，其与CSF-1R相互作用会使受体发生二聚化反应，随后可以与细胞内的多条信号通路发生相应的作用，比如JAK/STAT等，与不同细胞作用会产生不同的生物学效应[2-3]。2006年时相关学者以小鼠为例，使用抗M-CSF逆转了种植在小鼠身上的MCF-7细胞，这说明在治疗乳腺癌中，抗M-CSF是一种潜在的治疗方法[4]。对妇女而言，宫颈癌是第二种常见的恶性肿瘤疾病，临床上的常见药物为顺铂类药物，但是容易产生耐药性[5-6]。因此，对人宫颈癌HeLa细胞核内的M-CSF研究具有深远的意义。本研究对其进行相应研究，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

从北京医科大学细胞库中购入人宫颈癌HeLa细胞，转染的HeLa-C细胞以及转染M-CSF细胞等需要在前期通过实验转染得到。所使用的MTT从Sigama公司购买。顺铂从哈尔滨三联制药公司购入，紫杉醇为齐鲁制药公司生产。DMSO由美国Ameresco公司生产，低温高速离心机从德国引入，生化培养箱为SANYO公司生产，其他试剂为我国国内生产。……