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维吾尔族人群外周血DNA提取质量因素分析

2017-06-29刘树虎热比亚木巴克布帕提玛穆阿布都克热穆多力坤买买提玉素甫

实验技术与管理 2017年5期
关键词:方法质量

刘树虎, 热比亚木·巴克, 布帕提玛穆·阿布都克热穆, 多力坤·买买提玉素甫

(新疆大学 生命科学与技术学院, 新疆 乌鲁木齐 830046)

维吾尔族人群外周血DNA提取质量因素分析

刘树虎, 热比亚木·巴克, 布帕提玛穆·阿布都克热穆, 多力坤·买买提玉素甫

(新疆大学 生命科学与技术学院, 新疆 乌鲁木齐 830046)

使用改良盐析法、改良酚/氯仿法、改良碘化钾法和试剂盒法,分别对在-80 ℃保存1~4年的维吾尔族人群血样提取DNA,分光光度仪检测DNA浓度和纯度,0.8%琼脂糖电泳检测,提取的DNA质量采用单因素方差分析比较。结果表明,改良碘化钾法提取DNA质量最好,其次是试剂盒法、酚/氯仿提取法,盐析法提取质量最差;冻存1~4年的血样提取的DNA浓度之间差异极显著(F=618.011,P=0.000),冻存1~4年的血样提取的DNA纯度之间差异极显著(F=27.090,P=0.000)。该研究基于经济实惠、方便操作,提取DNA质量的高低可以确定改良碘化钾法提取DNA质量最好;血样本冻存(-80℃)超过3年对提取的DNA质量有显著的影响。

维吾尔族人群; 冻存外周血; DNA提取; DNA质量; 单因素方差分析

随着技术的进步,人类的迁徙、演变、遗传变异的蓝图已经越来越清晰地展现在人们的眼前。生物学、遗传学和临床医学等越来越多的学科领域都离不开基因分析技术。因此如何快速、经济地从外周血中提取高产量、高纯度的基因组DNA已成为首要的问题,也是后续试验成功的关键[1-3]。目前,外周血DNA的提取方法较多,如:常规酚/氯仿提取法、碘化钾法等[4-7],了解各种方法的特点并熟练运用一种快速有效的DNA提取方法是无可非议的,但是一些高新设备仪器、尖端试剂盒的出现使人们渐渐把传统的技术方法抛之脑后,随之带来的是一些傻瓜式的操作、铁定的实验流程,人的实验操作能力日益衰减。……

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