仲 琳， 梁平平▲， 龚 磊， 王佳慧， 朱玉洁， 林泽润， 杨 军△

(青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院 1心内科， 2生物芯片实验室， 3中心实验室，山东 烟台 264000)

半乳糖凝集素3对内皮细胞生长、迁移及炎症反应的影响*

仲 琳1， 梁平平1▲， 龚 磊2， 王佳慧3， 朱玉洁1， 林泽润1， 杨 军1△

(青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院1心内科，2生物芯片实验室，3中心实验室，山东 烟台 264000)

目的： 探讨半乳糖凝集素3(GAL-3)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)生长、迁移及炎症反应的影响及其作用机制。方法: 体外培养HUVECs，给予GAL-3重组蛋白2 mg/L或GAL-3短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体处理，实验分为正常对照组、GAL-3重组蛋白处理组、阴性对照组和GAL-3-shRNA组。通过实时荧光定量PCR检测GAL-3、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、IL-6、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和cyclin D1的mRNA水平；利用Western blot 检测 GAL-3、MCP-1和IL-6的蛋白表达；利用ELISA检测MCP-1和IL-6在培养基中的水平；通过CCK-8实验和划痕实验检测HUVECs的活力和迁移能力；利用Western blot检测信号分子热休克蛋白90(HSP90)、ERK1/2、p-ERK1/2、JNK和p-JNK的蛋白水平。结果: 首先，给予GAL-3重组蛋白处理后，GAL-3、MCP-1和IL-6的mRNA及蛋白水平，MMP-9和cyclin D1的mRNA水平，MCP-1和IL-6在培养基的分泌水平均明显高于正常对照组；而GAL-3-shRNA感染细胞后，上述分子的表达水平均低于正常对照组和阴性对照组。其次，GAL-3重组蛋白处理后，细胞活力和迁移能力明显高于正常对照组；而GAL-3-shRNA感染后，细胞活力和迁移能力均低于正常对照组和阴性对照组。此外，GAL-3重组蛋白处理组中，p-ERK1/2和HSP90 的蛋白水平高于正常对照组；而GAL-3-shRNA 组中，p-ERK1/2和HSP90 的蛋白水平均低于正常对照组和阴性对照组。p-JNK的蛋白水平在各组间比较，差异无统计学显著性。结论: GAL-3促进血管内皮细胞的生长、迁移及炎症反应的发生，其机制可能与HSP90-ERK1/2信号通路有关。……