贺昱霖， 刘佳琪， 刘 群， 李 欢， 龙 辉， 孟忠吉， 吴清明△

(武汉科技大学 1医学院， 2附属天佑医院消化内科， 湖北 武汉 430065；3十堰市太和医院生物医学研究所， 湖北 十堰 442000)

Sonic hedgehog信号通路与食管癌放射抗拒的相关性研究*

贺昱霖1,3， 刘佳琪1， 刘 群2， 李 欢2， 龙 辉2， 孟忠吉3， 吴清明1△

(武汉科技大学1医学院，2附属天佑医院消化内科， 湖北 武汉 430065；3十堰市太和医院生物医学研究所， 湖北 十堰 442000)

目的： 研究Sonic hedgehog (Shh)信号通路在食管癌放射抗拒中的作用及机制。方法: 以人食管癌细胞Eca109为亲本株，通过X射线反复照射(累计照射剂量60 Gy)诱导形成放射抗拒细胞株Eca109R。分别采用集落形成实验检测细胞放射敏感性，CCK-8实验检测细胞活力的变化，来证实放射抗拒细胞株Eca109R的放射抗拒性。免疫荧光及Western blot检测Eca109R和亲本细胞Eca109内Gli1蛋白与Shh蛋白的表达。结果: 集落形成实验显示2 Gy的X线照射后，Eca109和Eca109R细胞的存活分数(SF2)分别为0.499±0.042和0.937±0.013；同时，CCK-8实验显示，Eca109R细胞的活力抑制率明显低于Eca109细胞(P<0.05)，证实Eca109R细胞有明显的放射抗拒性，诱导形成放射抗拒株成功。免疫荧光结果显示Eca109R细胞中Gli1表达明显高于Eca109细胞(P<0.05)。Western blot实验结果显示Eca109R细胞中的Gli1与Shh蛋白表达明显高于Eca109细胞(P<0.05)。结论: 食管癌放射抗拒性的产生可能与Shh信号通路相关蛋白的过表达有关。

食管癌； 放射抗拒性； Sonic hedgehog信号通路

食管癌(esophageal cancer)是消化系统常见的恶性肿瘤之一，其在世界范围内的发病率位于恶性肿瘤的第8位，死亡率位于第6位[1-2]，放射治疗是最有效的治疗手段之一，但放射治疗可能引起肿瘤对放疗产生抗拒性。近年来，有研究发现，Sonic hedgehog (Shh)信号通路与消化道肿瘤的发生密切相关[3-4]，Gli1是Shh信号通路下游的转录因子，Gli1表达水平的上调代表Shh信号通路的激活,食管鳞癌中存在Shh信号通路相关基因的高表达[5-6]。本实验通过反复照射食管癌细胞系Eca109，建立食管癌放射抗拒细胞系，并检测细胞中Gli1与Shh蛋白的表达，探究Shh信号通路与食管癌放射抗拒性之间的关系，为临床提高食管癌放疗疗效提供新的方案和依据。……