廖贵华， 黄文峰

(三峡大学中医临床医学院， 宜昌市中医医院耳鼻咽喉头颈外科， 湖北 宜昌 443003)

p62在喉癌Hep-2细胞化疗耐药中的作用*

廖贵华， 黄文峰△

(三峡大学中医临床医学院， 宜昌市中医医院耳鼻咽喉头颈外科， 湖北 宜昌 443003)

目的： 探讨p62在喉癌细胞Hep-2 化疗耐药中的作用及潜在的作用机制。方法: 实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)及Western blot法检测喉癌耐药细胞Hep-2/5-FU及其亲本细胞Hep-2中p62的表达水平。在Hep-2/5-FU细胞中转染p62 siRNA敲减p62的表达，采用CCK-8法和流式细胞术检测细胞生存率及细胞凋亡状态；检测细胞中丙二醛(malondialdehyde，MDA)的含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)的活性来反映细胞氧化应激水平。Western blot检测细胞凋亡相关调控因子Bcl-2、Bax、caspase-8/cleaved caspase-8、caspase-3/cleaved caspase-3的蛋白水平及抗氧化通路Keap1/Nrf2的活性。结果: 耐药细胞株Hep-2/5-FU中p62的mRNA及蛋白表达水平均明显高于亲本细胞株Hep-2；并且在亲本细胞株Hep-2中，p62和Nrf2的蛋白表达水平随着顺铂的浓度增加不断升高。沉默p62可抑制喉癌耐药细胞Hep-2/5-FU的生存，促进其凋亡，上调MDA的含量，降低SOD和GSH-Px的活性，同时上调Bax、cleaved caspase-8、cleaved caspase-3和Keap1的蛋白水平，下调Bcl-2、Nrf2及HO-1的蛋白表达。结论: 喉癌耐药细胞Hep-2/5-FU中沉默p62可恢复细胞对5-FU的敏感性，其机制可能与抑制Keap1/Nrf2信号通路的活化、调控细胞内氧化应激反应及细胞凋亡有关。

p62; 喉癌; 氧化应激; 细胞凋亡

喉癌是耳鼻喉头颈外科的一种常见肿瘤，目前的治疗依然以外科手术并应用化疗药物为主，但化疗过程中出现的肿瘤耐药性大大影响了治疗效果，同时降低了患者术后生存率[1-3]。因而研究喉癌化疗耐药的相关机制，寻找耐药基因对喉癌的个体化诊疗具有十分重要的意义。……