黄琦丹 陈家康 刘 全 郑捷敏

(广西医科大学第四附属医院神经外科一病区，广西 柳州 545005)

SENP1蛋白在老年脑胶质瘤中的表达及其与预后的相关性

黄琦丹 陈家康 刘 全 郑捷敏

(广西医科大学第四附属医院神经外科一病区，广西 柳州 545005)

目的 探讨SUMO特异性蛋白酶(SENP-1)蛋白在老年脑胶质瘤中的表达及其与预后的相关性。方法 145例老年脑胶质瘤患者，选取脑胶质瘤癌灶旁未见明显组织学改变的组织区域正常脑组织为对照组。根据免疫组织化学法检测SENP1蛋白在老年胶质瘤及正常脑组织中表达的结果，比较SENP1蛋白在两组中的阳性表达率。分析脑胶质瘤组织中SENP1蛋白的阳性表达与临床病理特征的关系，应用Kaplan-Meier法分析SENP1蛋白表达与脑胶质瘤预后的关系。结果 SENP1在脑胶质瘤组织中的阳性表达率高于正常脑组织(P<0.05)。SENP1在临床分期为Ⅲ和Ⅳ期的脑胶质瘤组织中的阳性表达显著高于Ⅰ和Ⅱ期，在淋巴结转移组织的表达显著高于无淋巴结转移者，大病灶组织中SENP1的阳性表达显著高于小病灶组(P<0.05)，在不同性别患者中，不同分化程度中的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。提示SENP1的表达与脑胶质瘤的临床分期、淋巴结转移和脑胶质瘤的病灶大小相关。SENP1阴性表达组的中位生存期显著高于阳性表达组(P<0.05)。结论 SENP1在脑胶质瘤组织中的阳性表达显著增强，且与老年患者的预后密切相关，SENP1阴性表达的老年脑胶质瘤患者具有更长的生存期。

SUMO特异性蛋白酶；脑胶质瘤

脑胶质瘤具有浸润性生长，手术难度大，难以完全切除等特点，因此死亡率较高，预后较差〔1〕。肿瘤细胞的增生得益于对于缺氧微环境的适应，介导此过程的关键性转录调控因子是缺氧诱导因子(HIF)-1α〔2〕，其表达和活性对维持肿瘤细胞能量代谢、细胞增殖和肿瘤血管生成具有重要作用，而SENP1是在缺氧环境中维持 HIF-1α生物功能的关键调节因子，能催化大量类泛素化蛋白与HIF-1α发生去SUMO化，此功能的紊乱与多种肿瘤的发生、发展和肿瘤细胞的增殖密切相关〔3,4〕。本研究通过检测SENP1在老年脑胶质瘤石蜡切片中的表达，分析其与临床预后的相关性，探讨SENP1的表达与临床病理因素及预后之间的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2007年7月至 2012年7月广西医科大学第四附属医院收治的145例老年脑胶质瘤患者，全部病例均经术后病理检查证实，其中男83例，女62例，年龄65～82〔平均(73.8±6.3)〕岁。临床分级Ⅰ级35 例、Ⅱ级29例、Ⅲ级53例、Ⅳ级28例。将脑胶质瘤手术切除石蜡标本进行苏木素-伊红(HE)染色病理确认，选取脑胶质瘤癌灶旁未见明显组织学改变的组织区域正常脑组织为对照组。入选标准：(1)年龄65岁以上；(2)脑胶质瘤患者均经术后病理证实；(3)均为初治患者，术前未接受放化疗及生物治疗，有完整的临床数据。本研究均获得患者的知情同意，通过医院伦理委员会审核批准。

1.2 处理方法 脑胶质瘤组和对照组的标本均经 4%甲醛溶液固定24 h，常规石蜡包埋，制备4 μm厚的切片，进行免疫组化染色，采用免疫组化(SP法)检测SENP1蛋白表达。全部操作均参照试剂盒说明书进行。已知SENP1阳性的脑胶质瘤标本作为阳性对照，磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作为阴性对照。兔抗人 SENP1 抗体和试剂盒购自武汉博士德生物工程公司。结果判定：于高倍显微镜下观察每张切片中细胞密集处的5个视野，以细胞质内出现清晰可见的棕黄色或棕色颗粒为阳性标准，对每个视野的阳性细胞数进行计数，阳性细胞率<10%为阴性，≥10%为阳性。

1.3 统计学方法 应用SPSS17.0软件进行t检验、χ2检验和Kaplan-Meier生存分析。

2 结 果

2.1 老年胶质瘤及正常脑组织中SENP1的表达 SENP1在正常脑组织中的阳性表达率仅为22.9%(22例)，显著低于在脑胶质瘤中的51.0%(74例；χ2=16.953，P<0.05)。

2.2 脑胶质瘤组织中SENP1蛋白表达与临床病理参数的比较 SENP1在临床分期为Ⅲ和Ⅳ期的脑胶质瘤组织中的阳性表达显著高于Ⅰ和Ⅱ期 (P<0.05)，在淋巴结转移组织的表达显著高于无淋巴结转移者(P<0.05)。而SENP1在不同性别、不同分化程度中的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。将脑胶质瘤病变大小直径≥3 cm组织中SENP1的阳性表达显著高于直径<3 cm组织(P<0.05)。见表1。

2.3 SENP1蛋白表达与脑胶质瘤预后的关系 SENP1阴性表达患者的中位生存期(23.0个月)显著高于阳性表达者为(15.2个月，P<0.05)。见图1。

图1 SENP1蛋白表达与脑胶质瘤预后的关系

临床指标nSENP1蛋白阳性(n=74)χ2值P值性别 男83413.217>0.05 女6233病变大小(cm) <3601212.075<0.05 ≥38562临床分期 Ⅰ～Ⅱ642116.385<0.05 Ⅲ～Ⅳ8153分化程度 高分化47325.029>0.05 中分化5425 低分化4417淋巴结转移 无转移79259.623<0.05 转移6649

3 讨 论

老年颅内肿瘤患者由于其特殊的病理、生理特点而具有特殊的临床特点〔4〕。首先，老年患者的脑组织常伴有不同程度的生理性功能衰退，当发生颅内肿瘤时，患者的早期神经系统体征不明显，因此误诊率较高，常误诊为老年痴呆、脑功能衰退或脑血管疾病等〔5〕。其次，老年人常伴随退行性病变，多合并其他基础疾病，如高血压、糖尿病、心血管疾病等，因此老年颅内肿瘤患者常伴有较多的并发症，为治疗带来困难，预后较差。

脑恶性胶质瘤是神经系统肿瘤中发生率较高的一种颅内原发肿瘤，约占神经系统肿瘤的40%～60%〔6〕。老年脑胶质瘤患者的生存时间显著低于年轻患者，且临床研究对于老年人脑胶质瘤群体关注较少。SENP1在脑胶质瘤的发生和转移中发挥重要作用，多项研究结果显示多种肿瘤中均存在SENP1蛋白表达异常，如肝细胞癌〔7〕、前列腺癌〔8〕、肺癌〔9〕和乳腺癌等〔10〕。近年来手术治疗和化学药物治疗成为治疗脑胶质瘤的主要措施，然而部分脑胶质瘤患者的治疗效果和预后较差，因此寻求新的治疗靶点至关重要。

本研究结果提示在正常脑组织中，SENP1处于低表达状态。脑胶质瘤患者中SENP1水平升高，结合型SUMO蛋白发生去SUMO化过程〔11〕，其次 HIF-1α蛋白去 SUMO 化后的功能抑制作用被去除，HIF-1α的转录活性增强，促进下游靶基因转录，诱导血管内皮生长因子(VEGF)的产生并介导新生血管大量生成〔12〕；改善缺氧环境，肿瘤细胞快速增殖，导致正常上皮细胞向肿瘤细胞分化，加速肿瘤进展〔13〕。SENP1通过促进肿瘤的血管增生过程在肿瘤的进展中发挥重要作用。

Kaplan-Meier 生存分析结果提示SENP1是影响老年胶质肿瘤预后的因素，本研究进一步提示SENP1在脑胶质瘤发生中具有重要作用，与脑胶质瘤进展程度密切相关，可能作为胶质瘤潜在的预后指示标志物。

1 罗泽旭,李 岩,罗文超,等.RUNX3蛋白在脑胶质瘤中的表达特点及临床意义〔J〕.大连医科大学学报,2015;37(1):17-9.

2 Zhao T,Ren H,Jia L,etal.Inhibition of HIF-1α by PX-478 enhances the anti-tumor effect of gemcitabine by inducing immunogenic cell death in pancreatic ductal adenocarcinoma〔J〕.Oncotarget,2015;6(4):2250-62.

3 Burdelski C,Menan D,Tsourlakis MC,etal.The prognostic value of SUMO1/Sentrin specific peptidase 1(SENP1) in prostate cancer is limited to ERG-fusion positive tumors lacking PTEN deletion〔J〕.BMC Cancer,2015;15:538.

4 Bhujbal SV,de Ves P,Niclou SP.Drug and cell encapsulation:alternative delivery options for the treatment of malignant brain tumors〔J〕.Adv Drug Deliv Rev,2014;67-68(1):142-53.

5 Tonning OI,Perrin S,Lundgren J,etal.Long-term cognitive sequelae after pediatric brain tumor related to medical risk factors,age,and sex〔J〕.Pediatr Neurol,2014;51(4):515-21.

6 吕东阳,阎 英,徐 莹,等.放疗联合替莫唑胺治疗老年人恶性胶质瘤的护理研究〔J〕.实用药物与临床,2015;18(11):1392-5.

7 Zhang W,Sun H,Shi X,etal.SENP1 regulates hepatocyte growth factor-induced migration and epithelial-mesenchymal transition of hepatocellular carcinoma〔J〕.Tumor Biol,2016;37(6):7741-8.

8 Li T,Huang S,Dong M,etal.Prognostic impact of SUMO-specific protease 1(SENP1) in prostate cancer patients undergoing radical prostatectomy〔J〕.Urol Oncol,2012;31(8):1539-45.

9 Wang R,Zhi X,Zhang YI,etal.Inhibition of SENP1 induces radiosensitization in lung cancer cells〔J〕.Exp Ther Med,2013;6(4):1054-8.

10 Mirecka A,Morawiec Z,Wozniak K.Genetic polymorphism of SUMO-specific cysteine proteases-SENP1 and SENP2 in breast cancer〔J〕.Pathol Oncol Res,2016;22(4):817-23.

11 Bawa-Khalfe T,Yeh ET.SUMO losing balance:SUMO proteases disrupt SUMO homeostasis to facilitate cancer development and progression〔J〕.Genes Cancer,2010;1(7):748-52.

12 陈 军,王 坚,顾红玉,等.SENP1与CerBb-2蛋白表达在乳腺癌中的临床意义〔J〕.诊断学理论与实践,2009;8(2):175-9.

13 刘 延,李湘竑,杨定华,等.SENP-1和HIF-1α在肝细胞肝癌中的表达及临床意义〔J〕.中山大学学报(医学科学版),2012;33(4):465-70.

〔2016-12-11修回〕

(编辑 袁左鸣/滕欣航)

广西自然科学基金青年项目(2016GXNSFA380133)；柳州市应用技术研究与开义计划课题(2015J030511)

郑捷敏(1973-)，男，主任医师，主要从事中枢神经系统肿瘤手术治疗研究。

黄琦丹(1980-)，男，主治医师，主要从事中枢神经系统肿瘤手术治疗研究。

R73

A

1005-9202(2017)11-2741-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.11.062