孙晓慧，王 燕，牟艳玲

(1.济南大学 山东省医学科学院医学与生命科学学院，山东 济南 250200；2.山东省医学科学院药物研究所，山东 济南 250062;3.国家卫生部生物技术药物重点实验室，山东 济南 250062;4.山东省罕少见病重点实验室，山东 济南 250062)

2型糖尿病大鼠心肌PI3K/Akt/mTOR信号通路的改变及Sirt1的调控机制研究

孙晓慧1,2,3,4，王 燕2,3,4，牟艳玲2,3,4

(1.济南大学 山东省医学科学院医学与生命科学学院，山东 济南 250200；2.山东省医学科学院药物研究所，山东 济南 250062;3.国家卫生部生物技术药物重点实验室，山东 济南 250062;4.山东省罕少见病重点实验室，山东 济南 250062)

目的 检测Sirt1及PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白在糖尿病大鼠心肌及高糖培养的H9C2细胞中的表达变化，明确其在糖尿病心肌病发生发展中的作用。方法 高脂饮食联合链脲佐菌素建立2 型糖尿病大鼠模型，实验将大鼠分为糖尿病2周、4周、8周模型组和对照组，超声心动图检测大鼠心功能变化，Western blot检测大鼠心肌Sirt1、PI3K、Akt、mTOR、S6K1蛋白表达变化。将H9C2细胞分为正常对照组、DMSO组(78.12 mmol·L-1)、高糖(HG)组(33 mmol·L-1)、白藜芦醇(Res)组(20 μmol·L-1)、尼克酰胺(Nam)组(40 mmol·L-1)，Western blot及qRT-PCR研究心肌细胞Sirt1、PI3K、Akt、mTOR、S6K1相关蛋白基因转录及表达，研究Sirt1对该信号通路的调控机制。结果 在动物实验中，与2周DM大鼠比较，8周DM大鼠心肌Sirt1蛋白表达明显增加。2周模型组大鼠相对于正常对照组心肌PI3K、Akt、mTOR、S6K1表达明显增加，且S6K1表达4 周模型组比2周模型组增加更明显，但8周表达降低。在高糖培养的H9C2细胞中，与对照组相比，高糖组Sirt1, PI3K, Akt, mTOR和S6K1表达明显增高。Nam处理组Sirt1表达明显降低，PI3K, Akt, mTOR和S6K1表达增高。Res处理组Sirt1表达明显增高，而PI3K, Akt, mTOR和S6K1表达降低。结论 Sirt1通过负调控PI3K/Akt/mTOR信号通路参与糖尿病心肌损伤，参与早期糖尿病心肌病的发生发展。……