肿瘤患者细胞免疫特征分析

迟艳新

目的分析肿瘤患者细胞免疫的特征。方法用流式细胞仪检测肿瘤患者的细胞免疫状态，并与正常体检者比较。结果两组肿瘤患者组与对照组比较，CD3+CD4+、CD4+CD45RA细胞以及CD4+/CD8+比值降低，CD3+CD8+、CD4+CD45RO以及CD8+CD28-细胞升高（P＜0．05）。结论肿瘤患者T淋巴细胞的变化情况的检测，有助于临床医生了解患者肿瘤发展程度和手术疗效。

肿瘤患者；细胞免疫；T淋巴细胞

肿瘤的发生和发展与机体的免疫系统具有密不可分的关系，免疫系统的紊乱、免疫功能的低下可能是导致肿瘤产生的因素。人体发挥免疫功能的淋巴细胞，主要包括T细胞、B细胞以及NK细胞等免疫细胞，通过释放免疫因子发挥免疫效应。本文通过分析肿瘤患者与正常对照人群的细胞免疫状态的差异，旨在为肿瘤患者的诊断和治疗提供参考。

1 资料与方法

1.1 研究对象与分组

选择2013年5月—2016年5月本院收治的肿瘤患者80例，其中包括直肠癌患者40例，男22例，女18例，年龄38～76岁，平均（62.7±10.9）岁。乳腺癌患者40例，均为女性患者，年龄39～83岁，平均（65.8±12.6）岁。同时选择同期健康门诊患者40例作为对照组，男19例，女21例。采集静脉血，采集量至少1 ml，样本的采集应在6小时内处理，冷冻的标本不能用。溶血样本不能用。

1.2 实验方法

首先，取采集的血液作为检验样品，应用流式细胞仪进行检测。打开流式细胞仪，预热系统，给待检测样品管中加入去离子水，随后使用去离子水冲洗流式细胞仪液流的喷嘴系统；用校准标准样品对仪器进行调整，调定激光功率、光电倍增管电压、放大器电路增益等，调节荧光强度至最强，变异系数最小。把样品信息登记至实验记录本。

随后，向试管中分别加入5 μl 抗人CD4抗体、抗人CD8抗体、抗人CD3抗体，并加入抗凝血40 μl ，振荡混匀后避光静置保存20 min，用震荡器边震荡边加入缓冲液600 μl，7秒后，加入上样液260 μl待测。抗人CD4抗体、抗人CD45RO抗体需在此基础上混匀，1 000 rpm条件下离心5 min，倒上清液体，留残液，加适量PBS待测。

选择预先存储的检测软件，同时将样品和阴性对照放入检测台，自动检测样品管并进行数据采集，得出检测结果。

1.3 统计学处理

采用SPSS 10.0软件统计分析，计量资料用（）表示，使用t检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 T细胞亚群、NK细胞比较

肿瘤患者组与对照组比较，T细胞亚群中，患者组CD3+CD4+细胞降低（P＜0.01），CD3+CD8+细胞升高，差异有统计学意义（P＜0.05）（见表1）。

2.2 CD4+、CD4+CD45RO及CD4+CD45RA比较

肿瘤组患者与对照组比较，CD4+CD45RO升高，CD4+CD45RA降低，差异有统计学意义（P＜0.05）。三组CD4+比较，差异无统计学意义（P＞0.05）（见表2）。

2.3 CD4+/CD8+、CD8+CD28+、CD8+CD28-比较

肿瘤组患者T细胞亚群中CD4+/CD8+比值降低（P＜0.05）；CD8+CD28-升高（P＜0.05）（见表3）。

3 讨论

CD3+CD4+T细胞是辅助性的细胞，主要起辅助作用。肿瘤患者一般CD3+CD4+T细胞明显减少，CD3+CD8+T细胞明显升高，正常对照组则无此现象。

CD3+CD4+T细胞亚群有辅助和诱导其它细胞的功能。CD3+CD4+T细胞亚群的减少必导致免疫应答减弱，CD3+CD4+T细胞亚群增多可引起免疫应答增强，在CD3+CD4+T细胞亚群的控制和引导下，机体免疫系统得以正常运行，CD3+CD4+细胞被称为人体免疫系统的大脑和中枢[1-3]。对CD3+CD4+的监测也是监测T淋巴细胞亚群的关键。

CD4+T按功能不同可分为CD4+CD45RO+T、CD4+CD45RA+T两类。CD4+CD45RO+T属于典型的记忆性的细胞，能接受抗原的刺激，粘附能力较强，并能再次分化。CD4+CD45RA+T不能接受抗原刺激，粘附能力也较低下，不能再次分化。有研究表明，肿瘤患者CD4+T细胞比例不变，肿瘤患者的CD4+CD45RO+T细胞在术后有所下降，CD4+CD45RA+T在术后有所上升[4]。CD4+CD45RO+T细胞和CD4+CD45RA+T细胞在肿瘤免疫中作用很大。单独看CD45RO T细胞亚群及CD45RA T细胞亚群作用不大。但综合各因素影响，综合考虑CD4+CD45RO+T细胞和在CD4+CD45RA+T的作用在肿瘤免疫中至关重要。CD4+CD45RA T细胞亚群和CD4+CD45RO T细胞亚群加在一起为CD4+T细胞亚群。一旦CD4+CD45RA T细胞亚群增加，CD4+CD45RO T细胞亚群则应相应的减少。一旦CD4+CD45RO T细胞亚群增加，CD4+CD45RA T细胞亚群则应相应的减少，以维持CD4+T细胞亚群的相对稳定。一旦这种平衡被打破，说明机体免疫状况被破坏，所以应及时监测CD4+CD45RO T细胞亚群，CD4+CD45RA T细胞亚群。

T细胞活化有两个不同的信号介导。CD3+CD8+细胞由CD28可以区分成T抑制细胞亚群CD8+CD28-和细胞毒T细胞亚群CD8+CD28+[5]。CD8+CD28-T细胞亚群具有免疫调节作用，还能杀伤效应细胞。本实验肿瘤患者CD8+CD28-细胞亚群高于对照组。肿瘤患者一般CD8+CD28-细胞亚群升高明显，导致总T淋巴细胞升高，引起CD4+/CD8+比例降低[6-7]。CD8+CD28-T细胞亚群对抗体的产生有抑制作用。

CD3+T细胞亚群、CD4+T细胞亚群、CD8+T细胞亚群在肿瘤免疫中相互影响，只有在CD3+CD4+T细胞亚群、CD3+CD8+T细胞亚群正常时，抗肿瘤作用才有效[4]。晚期恶性肿瘤患者普遍免疫功能低下，CD3+T细胞亚群、CD4+T细胞亚群降低，CD8+升高T细胞亚群、CD4+/CD8+比值降低或倒置来衡量机体免疫状态，CD4+CD45RO T细胞亚群升高、CD4+CD45RA T细胞亚群下降，表明机体免疫功能严重受损[8]。

表1 T细胞亚群、NK细胞比较

表2 CD4+、CD4+CD45RO及CD4+CD45RA比较

表3 CD4+/CD8+、CD8+CD28+、CD8+CD28-比较

综上所述，本研究显示通过对肿瘤患者T细胞亚群进行分析，可以对肿瘤有更全面的分析，对判断预后有一定好处。

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Analysis of Cellular Immune Characteristics in Cancer Patients

CHI Yanxin Clinical Laboratory Department, People's Hospital of Jilin, Jilin Jilin 132001, China

ObjectiveTo analyze the cellular immune characteristics in cancer patients.MethodsThe cellular immune status of the tumor patients were analyzed by flow cytometry, and the results were compared with the normal subjects.ResultsThe CD3+CD4+, CD4+CD45RA cells and the ratio of CD4+/ CD8+in the tumor groups were significantly lower than that in the control group, and CD3+CD8+, CD4+CD45RO and CD8+CD28-cells were significantly increased (P＜ 0.05).ConclusionThe detection of T lymphocyte changes in cancer patients help clinicians to understand the degree of tumor development and surgical efficacy.

cancer patients; cellular immunity; T lymphocytes

R730．51

A

1674-9316（2017）11-0110-03

10．3969/j．issn．1674-9316．2017．11．066

吉林市人民医院检验科，吉林 吉林 132001