常晨晨，吴 婷，2，汪梅芳，许贯诚，孙素荣

（新疆大学1.生命科学与技术学院，新疆生物资源基因工程重点实验室，3.应用化学研究所，先进功能材料自治区重点实验室，新疆乌鲁木齐 830046；2.新疆维吾尔自治区人民医院，新疆乌鲁木齐 830002）

吡唑啉酮衍生物镉（Ⅱ）配合物体内外对黑素瘤B16细胞的抗肿瘤作用

常晨晨1，吴 婷1，2，汪梅芳1，许贯诚3，孙素荣1

（新疆大学1.生命科学与技术学院，新疆生物资源基因工程重点实验室，3.应用化学研究所，先进功能材料自治区重点实验室，新疆乌鲁木齐 830046；2.新疆维吾尔自治区人民医院，新疆乌鲁木齐 830002）

目的研究吡唑啉酮镉（Ⅱ）配合物1-苯基-3-甲基-4-丙酰基-5-吡唑啉酮缩水杨酰肼-镉（Ⅱ）（Cd-PMPP-SAL）体内外对小鼠黑素瘤B16细胞的抗肿瘤作用及其作用机制。方法以Cd-PMPP-SAL 1.0，1.5，3.0，5.0和10.0 mg·L-1分别作用小鼠黑素瘤B16细胞24，48和72 h，采用MTT法检测B16细胞存活率；Cd-PMPP-SAL 6.25，12.50和25.00 mg·L-1作用B16细胞24 h，用Hoechst33258染色观察B16细胞形态，AnnenxinⅤ/PI双染色法检测B16细胞凋亡率；胱天蛋白酶活性检测试剂盒检测B16细胞内胱天蛋白酶活性。C57BL/6J小鼠皮下接种B16细胞制备荷瘤模型，5 d后分别瘤内注射Cd-PMPP-SAL 6.25，12.50和25.00 mg·kg-1，每天1次，连续12 d。每天检测体质量，给药结束后处死小鼠，测量瘤体积并测瘤质量，计算抑瘤率。HE染色法观察瘤体、肝和肺组织病理变化；免疫组织化学法检测肿瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）和成纤维细胞生长因子2（FGF2）蛋白表达；TUNEL法检测移植瘤组织内的细胞凋亡。结果Cd-PMPP-SAL抑制B16细胞存活，IC50为4.946 mg·L-1，95%置信限为4.24～5.65 mg·L-1；Cd-PMPP-SAL 12.50和25.00 mg·L-1作用24 h，B16细胞凋亡率为（12.8±1.4）%和（18.4±0.4）%，显著高于细胞对照组（1.7±0.1）（P＜0.01）；Cd-PMPP-SAL 25.00 mg·L-1组胱天蛋白酶3和9活性与细胞对照组比较显著增高（P＜0.01），胱天蛋白酶3/7活性变化不明显。……