刘川川，刘辉琦，曹学锋，刘 杰，吴 穹，王生兰

(青海大学医学院，青海，西宁 810001)

慢病毒介导RNA干扰沉默OPN基因抑制低氧引起的SD大鼠肺动脉血管平滑肌细胞增殖※

刘川川，刘辉琦，曹学锋，刘 杰，吴 穹，王生兰*

(青海大学医学院，青海，西宁 810001)

目的 观察慢病毒介导RNA干扰沉默骨桥蛋白(Osteopontin，OPN)基因对低氧刺激下SD大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法 SD大鼠肺动脉平滑肌细胞分为四组：常氧对照组、低氧对照组、低氧+空病毒组、低氧+ OPN沉默组，分别采用MTT法检测各组细胞的增殖能力，实时荧光定量法检测各组细胞OPN mRNA的表达情况，Western Blotting法检测各组细胞OPN蛋白表达水平。结果 2%低氧环境培养PASMCs细胞48 h，可使OPN的mRNA和蛋白表达量较常氧对照组增高，细胞增殖能力增强，差异有显著性(P<0.05)；肺动脉平滑肌细胞慢病毒感染72 h后低氧培养48 h，可使OPNmRNA相对表达量和蛋白表达量均低于低氧对照组和低氧+空病毒组，且细胞的增殖能力降低，差异有显著性(P<0.05)。结论 低氧刺激可使OPN表达量增加、肺动脉平滑肌细胞增殖；慢病毒介导RNA干扰沉默OPN基因可抑制低氧刺激引起的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖。

RNA干扰 低氧 骨桥蛋白 肺动脉平滑肌细胞

高原低压低氧环境是诱发多种高原病发生的主要原因，长期慢性低氧刺激可引起内皮细胞结构和功能紊乱，造成多种血管活性因子的释放，成为HPH(Hypoxic Pulmonary Hypertension，HPH)发生的潜在因素。HPH是因长期慢性低氧刺激，引起持续肺血管收缩、血管重塑甚至微血管血栓的形成，导致肺动脉压力和肺血管阻力升高，最终引发肺动脉高压，甚至造成右心负荷增加、右心衰竭的综合病症。目前对于HPH的发生机制仍不清楚，低氧刺激引起的肺血管重塑和中层肺动脉平滑肌细胞(Pulmonary Artery Smooth Muscle Cells，PASMCs)的异常增殖是有关机制的讨论热点[1-4]。

骨桥蛋白(Osteopontin，OPN)是一种多功能的磷酸化糖蛋白，在上皮细胞、血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、巨噬细胞等多种细胞及组织中均广泛表达。……