何彦春，曹丽萍，李生静，张 瑜

（1. 张掖市动物疫病预防控制中心，甘肃张掖 734000；2. 甘肃省动物疫病预防控制中心，甘肃兰州 730000；3. 临泽县动物疫病预防控制中心，甘肃临泽 734200）

布鲁氏菌病活疫苗（M5株）和口蹄疫灭活疫苗同时免疫绵羊的试验

何彦春1，曹丽萍2，李生静3，张 瑜3

（1. 张掖市动物疫病预防控制中心，甘肃张掖 734000；2. 甘肃省动物疫病预防控制中心，甘肃兰州 730000；3. 临泽县动物疫病预防控制中心，甘肃临泽 734200）

为研究布鲁氏菌病活疫苗（M5株）和口蹄疫灭活疫苗同时免疫绵羊后的效果，选择50只育肥羊，分别用布鲁氏菌病活疫苗（M5株）和口蹄疫O型、亚洲I型二价灭活苗，同时对绵羊进行注射免疫，30 d后采血检测免疫抗体。结果表明：布鲁氏菌病虎红平板凝集抗体阳性率达100%，且均呈强阳性反应；O型和亚洲I型口蹄疫抗体合格率分别达78%和80%。试验结果初步证明，布鲁氏菌病活疫苗（M5株）和口蹄疫O型、亚洲I型二价灭活疫苗同时对绵羊进行免疫，同样可以达到预期的免疫效果。

布鲁氏菌病；口蹄疫；免疫效果；绵羊

布鲁氏菌病（以下简称布病）是由布鲁氏菌引起的人兽共患传染病。近年来，布病疫情在全国多地反弹，防控形势严峻，严重危害公共卫生安全。由于羊养殖量的不断增加，导致布病的检测面和检测量不断增大，防控任务量和资金供需矛盾加剧，使得检测净化工作难以为继。为尽快控制羊布病的反弹势头，保障人民群众身体健康和养羊业持续发展，根据《国家布鲁氏菌病防治计划（2016—2020年）》要求，在布病流行一类地区，尽快实施以强制免疫为主的防控策略。实施布病强制免疫后，必然会增加基层广大动物防疫人员的工作量。如果布病疫苗能与口蹄疫等疫苗同时免疫，便可大大减轻基层防疫人员的劳动强度。因此为研究布鲁氏菌活疫苗（M5株）和口蹄疫灭活苗同时免疫育肥绵羊的免疫效果，开展了本试验。

1 材料与方法

1.1 试验羊群及分组

选择4月龄左右育肥羊200只作为试验羊群。试验前进行布病和口蹄疫抗体检测，结果布病均为阴性，口蹄疫抗体水平均小于1:8。将200只试验羊随机分为4组，每组50只。第1组为空白对照组，不进行布病和口蹄疫免疫；第2组进行布病活疫苗（M5株）皮下注射免疫；第3组进行口蹄疫O型、亚洲I型二价灭活疫苗肌肉注射免疫；第4组同步进行布病活疫苗（M5株）皮下注射和口蹄疫O型、亚洲I型二价灭活疫苗肌肉注射免疫。

1.2 疫苗和免疫方法

布鲁氏菌活疫苗（M5株），天康生物股份有限公司生产，批号2015001。按照疫苗使用说明书要求，每只羊颈部皮下注射1头份。口蹄疫O型、亚洲I型二价灭活疫苗，批号201511003，中农威特生物科技有限公司生产。每只羊颈部肌肉注射1 mL，第4组开展免疫时两种疫苗分别注射于羊颈部两侧。

1.3 样品采集

免疫30 d后，对4组200只试验羊全部采血，无菌分离血清后进行抗体检测。

1.4 检测试剂及方法

1.4.1 布病免疫抗体检测。布病虎红平板凝集试验抗原、阳性血清、阴性血清，中国兽医药品监察所生产，批号201602。按照《动物布鲁氏菌病诊断技术》（GB/T 18646—2002）规定的方法，采用虎红平板凝集试验（RBPT）进行检测。

1.4.2 口蹄疫免疫抗体检测。口蹄疫O型、亚洲I型液相阻断ELISA检测试剂盒，中国农业科学院兰州兽医研究所生产，O型批号20160516101-12、亚洲I型批号2016062102-2。严格按照口蹄疫O型、亚洲I型液相阻断ELISA检测试剂盒说明书进行操作，O型、亚洲I型ELISA板，均按每板10头份进行操作。根据农业部《2016年国家动物疫病监测与流行病学调查计划》规定的标准，口蹄疫O型、亚洲Ⅰ型免疫21 d后的液相阻断ELISA抗体效价≥26为免疫合格。

2 检测结果

第1组：空白对照组，50只试验羊布病平板凝集抗体检测结果均为阴性，O型口蹄疫和亚洲Ⅰ型口蹄疫抗体口蹄疫抗体水平均小于1:8。

第2组：布病活疫苗（M5株）免疫组，50只试验羊布病平板凝集抗体检测均呈强阳性，抗体转阳率达100%，O型口蹄疫和亚洲Ⅰ型口蹄疫抗体口蹄疫抗体水平均小于1:8。

第3组：O型、亚洲I型口蹄疫免疫组，50只试验羊布病平板凝集抗体检测结果均为阴性，O型口蹄疫抗体合格40份，合格率80%（40/50），亚洲Ⅰ型口蹄疫抗体合格42份，合格率84%（42/50）。

第4组：布病活疫苗（M5株）和口蹄疫O型、亚洲I型二价灭活疫苗同步免疫组，50只试验羊布病平板凝集抗体检测均呈强阳性，抗体转阳率达100%，O型口蹄疫抗体合格39份，合格率为78%（39/50），亚洲Ⅰ型口蹄疫抗体合格40份，合格率为80%（40/50）。结果详见表1。

表1 血清抗体检测结果汇总（单位：只/%）

3 结论

李建玲等[1]报道，布病活疫苗（M5株）免疫羊30天后，虎红平板凝集抗体转阳率达100%。本试验结果表明，布病活疫苗（M5株）免疫育肥羊30天后，虎红平板凝集抗体转阳率达100%，布病活疫苗（M5株）和口蹄疫O型、亚洲I型二价灭活疫苗同时对育肥绵羊免疫30天后，布病虎红平板凝集抗体转阳率同样达100%。

根据农业部《2016年国家动物疫病监测与流行病学调查计划》规定的标准，口蹄疫免疫合格个体数量占群体数量的70%（含）以上即为免疫合格群体。本试验结果表明，布病活疫苗（M5株）和口蹄疫O型、亚洲I型二价灭活疫苗同时对绵羊免疫30 d后，O型口蹄疫液相阻断ELISA抗体合格率达78%，单独注射组合格率为80%；亚洲Ⅰ型口蹄疫液相阻断ELISA抗体合格率达80%，单独注射组合格率为84%。两组均合格且结果相近。

试验结果初步表明，布鲁氏菌活疫苗（M5株）和口蹄疫O型、亚洲I型二价灭活疫苗对育肥羊同步进行免疫，无相互干扰作用，完全可以达到预期的免疫效果，且同步免疫可加快免疫进度，大大减轻防疫员的劳动强度。

[1]李建玲，李爱巧，杨启元，等. 乌鲁木齐牛羊布鲁氏菌疫苗免疫效果对比试验[J]. 中国动物检，2013，30（4）：47-49.

（责任编辑：朱迪国）

Immune Responses in Sheep after Simultaneous Immunization with Brucellosis Live Vaccine（M5）and Foot and Mouth Disease Inactivated Vaccine

He Yanchun1，Cao Liping2，Li Shengjing3，Zhang Yu3
（1. Zhangye Animal Disease Prevention and Control Center，Zhangye，Gansu 734000；2. Gansu Animal Disease Prevention and Control Center；Lanzhou，Gansu 730000；3. Linze Animal Disease Prevention and Control Center，Linze，Gansu 734200）

In order to investigate the immune responses in sheep after simultaneous vaccination with Brucellosis live vaccine and Foot and mouth disease（FMD）inactivated vaccine，50 fattening sheep were immunized with both the Brucellosis live vaccine（strain M5）and FMD divalent vaccine（type O and Asia I）. 30 days after immunization，the post-vaccination antibodies of the sheep were detected. Results showed that the positive rate of antibodies against Brucellosis was 100% according to the Rose Bengal plate agglutination test，indicating a strong positive reaction. In addition，the qualifi cation rates of antibodies against FMD of type O and Asia I were 78% and 80%，respectively. As a conclusion，these preliminary results demonstrated that a desired immune effect could be achieved by simultaneously immunizing sheep with Brucellosis live vaccine（strain M5）and FMD divalent vaccine（type O and Asia1）.

Brucellosis；Foot and mouth disease；immune effect；sheep

S852.4

：B

：1005-944X（2017）05-0099-03

10.3969/j.issn.1005-944X.2017.05.027

曹丽萍