沈 芳，梁 培，陆 红

（浙江中医药大学药学院，浙江杭州 311402）

苦参碱（matrine，MT）具有抗心律失常［1］、减轻心肌损伤、抗纤维化［2-4］、抗炎［5-6］、抗病毒和升白细胞［7］等多种药理活性，是苦参（Sophora flavescensAit.）、山豆根（S.onkinensisGapnep.）和苦豆子（S.alopecuroidesL.）等中药材的活性成分［8］。苦参碱葡萄糖注射液、注射用苦参碱和含苦参碱的中药复方消银方等多种临床常用中药均含有苦参碱成分。在与苦参碱相关的不良反应报道中，最为严重的是神经系统不良反应［9］，临床表现为异常步态［10］、心跳加速、头晕眼花［11］、易兴奋、疲乏、言语不清和肌肉抽搐［12］等。本课题组前期研究结果表明，MT在10和40 mg·kg-1剂量下可抑制ICR小鼠中枢神经系统，损害其平衡协调能力［13］。

大脑组织富含多价不饱和脂肪酸［14］，对自由基非常敏感［15］；神经细胞为了维持正常生理功能需依赖高浓度葡萄糖代谢，线粒体氧化磷酸化是其主要糖代谢途径，当外界刺激使线粒体氧化磷酸化受损，导致神经细胞内活性氧（reactive oxygen species，ROS）堆积，引起氧化应激反应［16-17］，进而损伤DNA和蛋白质的结构，产生细胞毒效应［18］。本研究以PC12细胞为受试对象，研究MT的神经毒性，并探讨其毒性机制是否与ROS参与的线粒体途径诱导细胞凋亡有关。

1 材料与方法

1.1 药品、试剂和仪器

MT购于南京广润制品有限公司（白色粉末，纯度≥98%，批号：GR-133-140103）；DMEM/F12 培养基购于美国Gibco公司；胎牛血清（批号：130126）购于杭州四季青生物工程材料有限公司；胰蛋白酶-EDTA消化液（0.25%，T1320）购于中国Solarbio公司；甲基噻唑基四唑（methylthiazolyltetrazolium，MTT，批号：822A054）购于美国Sigma公司；Hoechst33342染色液（C1025）、AnnexinⅤ-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒（C1063）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）检测试剂盒（S0131）、总超氧化物歧……