仇保丰 景瑾 董蓉莲 宋鸿雁 刘春 朱顺星 邵义祥 刘文斌 李建

摘要：根据GenBank中已发表的柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella） SAG10基因序列，利用计算机软件设计1对引物，从E. tenella江苏株的第2代裂殖子中成功克隆出SAG10基因。将该基因与GenBank中国内外不同E. tenella分离株的SAG10基因进行比对，发现E. tenella江苏株与北京株的SAG10基因同源性最高，高达99%，其后依次为杨凌株、豪顿株。4种不同分离株SAG10基因的ORF之间有11个碱基不同，其中3个为无义突变，8个为有义突变。分析4种分离株SAG10基因推导蛋白质的亲水性、抗原指数、表面可及性发现，国内外不同E. tenella分离株SAG10蛋白的抗原性总体比较接近且很强，但国内不同分离株之间的抗原性更加接近，并优于国外的豪顿株，这可能是由于氨基酸突变引起蛋白质的空间构象和亲水性等发生变化而引起。将上述SAG10基因序列与复顶门原虫的其他相关SAGs基因序列进行遗传进化分析，发现Eimeria属球虫SAGs基因之间相对比较保守，且与犬新孢子虫（Neospora caninum）、N. hughesi、刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）的SAG基因之间同源性较低，与已有观点一致；但神经肉孢子虫（Sarcocystis neurona）的2条SAG1基因序列却与E. tenella的SAG1基因序列表现出更高的同源性，这与其他研究结论不符。

关键词：柔嫩艾美耳球虫；SAG10基因；克隆；分析

中图分类号： Q785文献标志码： A

文章编号：1002-1302（2017）03-0024-04

鸡球虫基因克隆始于1987年，迄今已有240多个基因被成功克隆，鸡球虫的重组疫苗也得到了广泛研究[1]。有分析认为，参与艾美耳球虫宿主细胞入侵过程的相关分子是最具应用潜力的保护性抗原，如子孢子和裂殖子表面抗原（surface antigens，簡称SAGs）以及微线、棒状体、折光体等分泌型亚细胞器的分泌蛋白[1-2]。……