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上海交通大学医学院附属新华医院1.药学部，2.儿神经内科（上海 200092）

人白细胞抗原B＊1502基因型和年龄对抽搐或癫痫患儿血同型半胱氨酸浓度的影响

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上海交通大学医学院附属新华医院1.药学部，2.儿神经内科（上海 200092）

目的探讨具有人白细胞抗原B*1502(HLA-B*15:02)不同基因型和年龄对抽搐或癫痫患儿血浆同型半胱氨酸(Hcy )浓度的影响，研究患儿血浆Hcy浓度的影响因素，以减少血浆Hcy增高所致的潜在致病风险。方法选取2015年10月至2016年6月间检测HLA-B*15:02基因型的抽搐或癫痫患儿15例，比较不同基因型患儿的血浆Hcy浓度；并将后者对应患儿年龄作线性回归分析。结果血浆Hcy平均浓度在未携带HLA-B*15:02基因患儿中为(8.38±4.23)μmol/L，在携带HLA-B*15:02基因患儿中为(13.03±0.97)μmol/L，携带者明显高于未携带者。随着患儿年龄增加，血浆Hcy浓度有增高趋势 (r2=0.29, P＜0.05 )。结论HLA-B*15:02基因携带者和较大年龄抽搐或癫痫患儿有发生血Hcy增高的倾向，增加患儿潜在致病风险。HLA-B*15:02基因型和年龄可预测抽搐患儿血浆Hcy浓度变化倾向。

同型半胱氨酸； 人白细胞抗原B*1502； 抽搐； 癫痫； 儿童

抽搐或癫痫症状出现于能引起神经系统损伤的疾病，而神经系统受损引起的抽搐多与脑内神经递质不平衡有关，同型半胱氨酸( homocysteine, Hcy)的浓度与此有密切关系[1,2]。Hcy是体内活性甲基供体S-腺苷甲硫氨酸循环的中间代谢产物，同时也是一种神经兴奋性毒性氨基酸，当其累积过多时，可刺激N-甲基-D-天门冬氨酸( N-methyl-D-aspartate, NMDA )受体，致神经元异常放电，引起抽搐发生或癫痫发作[3]。此外，高Hcy血症也被认为能作用于体内凝血系统多个方面，包括血管壁、血小板及凝血因子等，促进血栓形成，导致动脉粥样硬化等心脑血管事件的发生[4]。同时，研究认为抽搐或癫痫患儿在治疗过程中所应用的抗癫痫药物丙戊酸钠、卡马西平等也能导致体内血Hcy增高，从而引发上述Hcy潜在致病风险[4,5]。卡马西平是临床常用的一线抗癫痫药物，其不良反应的发生与个体是否携带人白细胞抗原B*1502( human leukocyte antigen B*15:02, HLA-B*15:02)基因密切相关[6]，而其同时会导致高Hcy血症。然而，迄今为止尚没有抽搐或癫痫患儿血Hcy浓度与HLA-B*15:02基因型的关联性研究。阐明这两者间的联系，分析HLA-B*15:02基因型对癫痫患儿的意义，将对抗癫痫药物的安全有效应用有很强的提示意义。因此，本研究旨在探讨HLA-B*15:02不同基因型和年龄因素对抽搐患儿血浆同型半胱氨酸浓度的影响，研究患儿血浆Hcy浓度可能的影响因素，以减少血浆高Hcy所致的潜在致病风险。

1 临床资料

选取新华医院2015年10月至2016年6月间的因抽搐住院或确诊为癫痫的患儿15例，均经临床和脑电图检查确诊，并排除其他影响血同型半胱氨酸水平的疾病，没有特殊饮食的患儿。见表1。

表1 患儿一般资料、HLA-B*15:02基因型及血Hcy浓度

取患儿静脉血3 mL，使用血清分离管分离血清，使用循环酶法检测血浆Hcy。该检测由专业技术人员操作完成。取静脉血2 mL，置于EDTA抗凝管中，使用北京华夏时代科技有限公司提供的测序反应通用试剂盒及荧光分析仪，以荧光原位杂交测序法检测HLA-B*15:02基因型。使用Prism 5.0 软件进行统计学处理。

15例患儿中，3例诊断为抽搐的患儿，血Hcy平均浓度为 (12.23 ± 0.15) μmol/L；12例诊断为癫痫的患儿，血Hcy平均浓度为 (8.77 ± 4.62) μmol/L；抽搐和癫痫患儿的血Hcy浓度无明显差异（P=0.25）。

根据检测结果HLA-B*15:02基因型分为两类：①未携带HLA-B*15:02基因患儿，即HLA-B*15:02纯合阴性HLA-B*15:02－/－；②携带HLA-B*15:02基因患儿，即HLA-B*15:02杂合阳性HLA-B*15:02+/－。其中纯合阴性患儿12例，占检测患儿总数的80%；杂合阳性患儿3例，占检测患儿总数的20%。15例患儿中未检测到HLA-B*15:02纯合阳性携带者(HLA-B*15:02+/+)。

HLA-B*15:02－/－患儿的Hcy平均血浓度为(8.38±4.23) μmol/L ( 95%CI： 5.69～11.06 )，HLA-B*15:02+/－患儿为(13.03±0.97) μmol/L（95%CI：10.62～15.45）。在HLA-B*15:02不同基因型患儿中，所有Hcy高于11.06 μmol/L 的患儿分布为未携带者有4例，占未携带者的33.33% (OR=0.33)，杂合携带者3例，占携带者的100% (OR=1)。两种基因型比较，HLA-B*15:02携带患儿Hcy血浓明显高于未携带患儿 ，杂合携带者发生Hcy升高的风险是未携带者的3倍 (OR=3.03，P＜0.05)，见表2，图1。

15例患儿，最小年龄2个月，最大年龄11岁，以患儿血浆Hcy浓度对患儿年龄作线性回归发现随着患儿年龄增大，血浆Hcy浓度有增高趋势，回归方程为：y=0.652x+7.502；患儿年龄与血Hcy浓度间存在明显正相关(r2= 0.29， P＜0.05 )，见图2。

表2 HLA-B*15:02不同基因型患儿血Hcy浓度升高的相对风险

图1 HLA-B*15:02不同基因型患儿血浆Hcy浓度比较

图2 患儿年龄与血浆Hcy浓度的散点图

2 讨论

引起患儿抽搐的多种病因均能导致脑部神经系统损伤，在此过程中，脑部神经递质的不平衡是机制之一。同时，该机制也存在于癫痫患者的发病与治疗过程中。其中兴奋性神经递质Hcy发挥着重要影响。研究证明，抗癫痫药物丙戊酸钠、卡马西平可引起患儿血浆Hcy增多，后者进一步刺激脑内神经元NMDA受体，致其异常放电，导致抽搐或癫痫[7-9]。同时，血Hcy增高也是引发体内血栓形成、脑卒中、动脉粥样硬化等心脑血管意外事件的独立危险因素[10,11]，因此Hcy的血浓度增高存在诸多潜在危害。

同时，抗癫痫药物卡马西平、奥卡西平等的药物敏感性及不良反应与是否携带HLA-B*15:02基因关系密切[12]。因此，研究HLA-B*15:02基因型与抽搐或癫痫患儿血Hcy间的关系以探讨后续用药风险及药物方案的调整具有重要意义。

本研究比较了抽搐与癫痫患儿的血Hcy浓度，两者间无明显差异。随后探讨了抽搐与癫痫患儿的血Hcy浓度与其HLA-B*15:02基因型的关系。研究已证明携带HLA-B*15:02基因患者对卡马西平高敏感，具有Steven-Johnson综合征和中毒性表皮坏死松解症的药物不良反应高发风险。而本研究发现HLA-B*15:02阳性杂合携带者血Hcy明显高于阴性未携带者，提示该基因携带者具有发生血Hcy增高倾向，除需慎用卡马西平外，在选择其他抗癫痫药如丙戊酸钠时也需警惕高Hcy血症的发生，从而导致癫痫或血栓相关事件。

此外，本研究发现在儿童患者中，年龄与血Hcy浓度间也存在明显相关性，回归分析显示年龄越大的患儿血Hcy有增高趋势。提示在儿童患者中，年龄对血Hcy浓度有明显影响。在使用抗癫痫药时，为了避免血Hcy浓度增高，除需考虑选药品种外，还需考虑患儿年龄因素。

本研究首次观察到抽搐或癫痫患儿HLA-B*15:02不同基因型和年龄对血Hcy浓度的关系，但不足之处在于样本量偏少，虽然由于HLA-B*15:02杂合携带者在亚裔人群中比例相对欧美人群偏高，但仍然只占10%～20%左右[6]，与本研究结果相符，也是本研究中HLA-B*15:02杂合携带患儿数量偏少的原因之一。同时，由于对HLA-B*15:02基因型的检测开展时间较短，病例数量积累有限，且研究对象为儿童这一特殊人群而非所有年龄段人群，研究的人群基数较小，导致了本研究病例数量受限，对研究结果可能会有一定影响。因此更全面的结论尚需依赖周期更长的大样本研究。

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Effect of human leukocyte antigen B*1502 genotype and age on serum homocysteine levels in children with seizures or epilepsy

ZHANG Chun1, HE Dake2, HUANG Xiaohui1, WEI Xin1, MA Jing1, QI Jia1, LIU Yan1, XU Ajing1, BO Shuhong1
(1.Department of Pharmacy, 2. Department of Pediatric Neurology, Xinhua Hospital Affiliated to Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200092, China)

ObjectiveTo explore the effect of human leukocyte antigen B* genotype and age on serum homocysteine (Hcy) levels in children with seizures or epilepsy.MethodsFifteen children with seizures or epilepsy in whom HLA-B*15:02 genotype was detected during October 2015 to June 2016 were included. The plasma Hcy concentration in children with different genotypes was compared. The association of Hcy concentration and age was performed by linear-regression analysis.ResultsThe mean concentration of Hcy was 8.38±4.23 μmol/L in children not carrying HLA-B*15:02 gene, which was obviously higher than that in children carrying HLA-B*15:02 gene 13.03±0.97 μmol/L (P＜0.05). The Hcy concentration increased with the age (r2=0.29, P＜0.05).ConclusionsElder children with seizures or epilepsy carrying HLA-B*15:02 gene tend to have higher Hcy concentration and increased potential risk of disease. HLA-B*15:02 gene type and age can predict the changes of Hcy concentration in children with convulsions.

homocysteine; human leukocyte antigen B*15:02; seizures; epilepsy; child

10.3969/j.issn.1000-3606.2017.03.008

2016-07-21)

(本文编辑：邹 强)

上海交通大学医学院基金 (No. 14XJ10033)

卜书红 电子信箱：sophia5237@126.com