杨庆忠，付宏伟，李新善

(1、江西省妇幼保健院核医学科，江西南昌330006；2、江西省人民医院检验科，江西南昌330006)

ROMA模型联合HE4与CA125检测在卵巢癌诊断中的作用

杨庆忠1，付宏伟1，李新善2

(1、江西省妇幼保健院核医学科，江西南昌330006；2、江西省人民医院检验科，江西南昌330006)

目的探讨卵巢恶性肿瘤风险计算法(ROMA)联合血清人附睾蛋白4(HE4)与糖类抗原125(CAl25)检测在预测卵巢癌诊断中的价值。方法采用通过化学发光方法检测100例卵巢癌患者(卵巢癌组)、100例卵巢良性肿瘤患者(良性组)及100例女性健康对照者(健康对照组)的血清HE4与糖类抗原CAl25浓度，采用ROMA方法计算卵巢癌预测概率(PP)，评价PP值的诊断效果。结果(1)卵巢癌组血清HE4和CAl25水平分别为320．2±210．6pmoL/L和350．6±162．8kU/L，卵巢良性肿瘤组血清HE4和CAl25水平分别为52．8±12．6pmoL/L和32．6±10．5kU/L，健康对照组血清HE4和CAl25水平分别为36．4±12．8pmoL/L和21．4±8．2kU/L，卵巢癌组血清HE4和CAl25水平分别与卵巢良性肿瘤组和健康对照组比较，差异均有统计学意义(P＜0．01)。(2)未绝经和绝经女性PP值的临界值分别为11．4%和29．9%，诊断未绝经患者的灵敏度和特异性分别为87．0%和83．8%，阳性预测值和阴性预测值分别为71．1%和93．4%；诊断绝经患者的灵敏度和特异度分别为88．4%和81．3%，阳性预测值和阴性预测值分别为91．0%和76．5%。结论ROMA联合血清HE4与CAl25判定有助于提高患者卵巢癌诊断的准确度。

卵巢恶性肿瘤风险计算法；人附睾蛋白4；糖类抗原125；卵巢癌

卵巢癌是较为多见的一种妇科恶性肿瘤，其患病率在女性恶性肿瘤中占第3位，治疗效果差，其病死率在妇科恶性肿瘤中居高不下。它发病隐匿，临床表现不明显，早期卵巢癌病人5年存活率可达90%，而已发生远处转移的晚期卵巢癌病人5年存活率往往不到30%[1，2]。故早发现早诊治是改善卵巢癌病人生存质量的首要因素。糖类抗原125(carbohydrate antigen 125，CAl25)的检测是目前临床妇科肿瘤使用最多的肿瘤标记物，常作为是否卵巢良恶性肿瘤的标杆。在正常卵巢表面上皮、卵巢上皮性良性和恶性病变组织中CAl25均有一定数量的释放，其灵敏性和特异性均不够满意，临床检验结果误诊率较高[3]。人附睾蛋白4(human epididymis protein 4，HE4)是近几年探求到的一种盆腔肿瘤组织标记物。在正常组织和良性肿瘤中HE4浓度极低，但在卵巢恶性肿瘤浓度较高。因此，血清HE4与CAl25联合检测在临床上对卵巢癌的诊断及治疗效果的评估有极大的帮助并可进一步提高卵巢良恶性肿瘤的鉴别诊断率[4，5]。本文对100例卵巢癌、100例卵巢良性肿瘤及100例健康女性的血清HE4与糖类抗原CAl25浓度，采用ROMA方法测定卵巢癌患病概率(PP)，来讨论HE4与CAl25联合检测对卵巢癌的临床诊疗意义。

1 资料与方法

1．1资料来源及分组选择2012年1月－2014年12月江西省妇幼保健医院收治的卵巢肿瘤住院患者200例，均病理切片确诊。所选病人均无明显并发症因素干扰肿瘤标志物测定。根据临床诊断金标准，组织病理学检查结果，将病人分为卵巢恶性病变组和卵巢良性病变组。卵巢恶性病变患者l00例(卵巢癌组)，均是本院初诊病人，年龄32～71岁，平均54岁；其中绝经69例，未绝经31例。卵巢良性病变患者100例(良性组)，年龄27～73岁，平均49岁，均无其他疾病和并发症，其中绝经32例，未绝经68例。健康对照组100例，均为健康成年女性，年龄28～74岁，平均51岁，均无盆腔和生殖器官疾病、消化道疾病。

1．2标本采集及处理所有研究对象(入院即采样)空腹抽取肘静脉血3～4ml，自然凝集45～60min，室温下4000r/min离心15min分离血清，罗氏日立样品杯分装封存后－80℃保存待测。

1．3血清HE4和CA125检测方法通过电化学发光法测定血清HE4、CA125。使用瑞士罗氏公司E－601电化学发光免疫分析仪及进口原装HE4、CA125试剂，质控品取用进口原装HE4、CAl25室内质控。按仪器和试剂盒的说明书操作。具体方法简述如下：第1次孵育：标本分别与生物素化的特异性单克隆抗体和钌复合体标识的特异性单克隆抗体结合，生成抗原抗体夹心化合物。第2次孵育：加入磁性微粒，该微粒被链霉亲合素包裹，前者生成的抗原抗体化合物通过生物素与链霉亲合素的相互作用并结合固相。反应液被吸入测量池，经过电磁力将磁性微粒吸附在电极表面。未与磁性微粒结合的物质通过三丙胺清洗液和预清洗液除去。经过电极施加一定的电压，使复合体化学发光，其发光强度由光电倍增器测量。经由检测仪设定好的标准曲线得到最终的化验结果，标准曲线是通过2点定标或试剂厂家自带曲线生成的。血清HE4和CA125使用的正常参考值分别是0～140pmol/L和0～35kU/L．

1．4 HE4与CA125联合检测及结合绝经状态预测盆腔包块患者中卵巢恶性肿瘤的发病风险模型（Risk of Ovarian Malignancy Algorithm，ROMA)。采用Moore等通过Logistic回归分析建立的ROMA计算：绝经前预测指数(PI)=－12．0+2．38×ln(HE4)+ 0．0626×ln(CA125)；绝经后预测指数(PI)=－8．09+ 1．04×ln(HE4)+0．732×ln(CA125)；风险预测概率(PP) =Exp(PI)/[1+Exp(PI)]。将每例患者的CA125和HE4测定值按是否绝经分别代入上述公式，算得PP值，根据特异度为75%时的PP值，作为判别高危、低危的阈值。

1．5统计学方法采用SPSS 13．0软件，计量资料采用多组秩和检验的两两比较方法，计数资料采用χ2检验，配对计数资料运用Wilcoxon配对检验。P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

2．1各组血清HE4与CA125水平比较卵巢癌组血清HE4和CAl25水平分别为320．2±210．6pmoL/ L和350．6±162．8kU/L，卵巢良性肿瘤组血清HE4和CAl25水平分别为52．8±12．6pmoL/L和32．6± 10．5kU/L，健康对照组血清HE4和CAl25水平分别为36．4±12．8pmoL/L和21．4±8．2kU/L，卵巢癌组血清HE4和CAl25水平分别与卵巢良性肿瘤组和健康对照组比较，差异均有统计学意义(P＜0．01)。见表1。

表1 各组血清CA125、HE4水平比较（x±s）

2．2 ROMA的应用价值以l00例卵巢癌患者为病例组，100例良性卵巢肿瘤组为对照组，当特异度为75%时，未绝经和已绝经女性PP值的临界值分别为11．4%和29．9%，以该临界值为标准，将卵巢肿瘤患者分为低危组和高危组。诊断未绝经患者的灵敏度和特异性分别为87．0%和83．8%，阳性预测值和阴性预测值分别为71．1%和93．4%；诊断绝经患者的灵敏度和特异度分别为88．4%和81．3%，阳性预测值和阴性预测值分别为91．0%和76．5%。见表2。

表2 ROMA法对不同绝经状态卵巢肿瘤患者的评估应用100(例)

3 讨论

卵巢癌是最常见的妇科恶性肿瘤，女性癌症患者死亡病因中位列第四。如能得到早期诊断并进行干预治疗，这种癌症可以达到临床治愈。然而，卵巢癌恶变早期通常无特异性症状，有70%～75%的卵巢癌都是出现远处转移才开始诊疗。国际癌症研究署曾经统计，卵巢癌患者的5年存活率为46%，假如该疾病能够早期诊断，存活率可达到94%[6，7]。因此，早期诊断成为治疗和预后的关键。

血清中CA125是卵巢上皮性类癌的相关性抗原，一般情况下不释放或甚少释放，但卵巢组织发生恶性病变时，胚胎样上皮细胞会释放一定量的CA125，诊断卵巢癌具有较高的敏感性。当然一些妇科良性病变CA125亦会升高，所以存在着组织或肿瘤的特异性以及早期诊断的敏感性不高等因素[8]。HE4属于乳清酸性四－二硫化物核心（WFDC）蛋白家族，怀疑有酪氨酸抑制剂化学性质[9]。HE4开始是在远端附睾上皮细胞中发现，在包括卵巢在内的呼吸和生殖系统组织上皮中呈低剂量释放，但在卵巢恶性细胞中大剂量释放，而在癌旁正常组织中并不释放，而且早期卵巢恶性组织中呈不同水平的释放增加，高水平释放还见于卵巢癌患者的血清中，因此预计HE4有助于上皮卵巢癌的风险评估[10]。

作为肿瘤标记物，HE4对于卵巢恶性病变的检测具有较高的灵敏度，尤其是对于I期无症状性早期疾病，联合CA125，HE4有95%的特异性，并且有高达76．4%的敏感度。此外，在子宫内膜癌早期，HE4比CA125要灵敏[11]。CA125水平正常，HE4的大剂量释放可能意味着存在卵巢恶性肿瘤或其他类型的恶性肿瘤，比如子宫内膜癌。结合肿瘤标记物CA125，HE4可帮助确定绝经期前和绝经期后妇女的盆腔肿瘤是否良恶性，联合二者检测可以提高检测的灵敏度和特异性[12]。CA125和HE4两种标记物检测相结合是比其中任何一种单用更为精准的癌性疾病预测诊断，可作为临床鉴别诊断卵巢癌诊断的首选无创检测方法[13]。王慜杰等研究得出由ROMA值结合绝经状态诊断出卵巢癌的敏感度和特异度分别为85．7%和77．1%，阐明了依据HE4和CA125结果联合绝经状态计算卵巢恶性肿瘤风险值(ROMA值)，在诊断卵巢癌的灵敏性和特异性均高于CA125一种肿瘤标记物检测，能很好的反映病情发展变化，可作为卵巢癌疗效评估的有效指标[14，15]。国外学者对ROMA用于对卵巢癌的普查已很普及，我国在一些大城市也在应用，但目前江西省未见此类研究的报道。

本实验选取江西省妇幼保健院2012年至2014年住院及门诊病人，体检人员作为研究对象，得出卵巢癌组血清HE4和CAl25水平分别与卵巢良性肿瘤组和健康对照组比较，差别均有显著统计学意义(P＜0．01)。采用ROMA模型，测定HE4和CA125结果联合绝经状态计算卵巢恶性肿瘤风险值(ROMA值)，未绝经及已绝经患者诊断卵巢癌的灵敏性和特异性与王慜杰等研究结果相符合，但比张碧莲诊断卵巢癌的敏感性和特异性分别要低，其具体原因有待分析[16]。本实验研究结果，未绝经患者中，卵巢癌阳性预测值为71%，卵巢良性肿瘤阴性预测值93．4%，已绝经患者中卵巢癌阳性预测值为91%，卵巢良性肿瘤阴性预测值76．5%，其较高的卵巢癌的阳性诊断和卵巢良性评估在卵巢良恶性病变及高危人群筛查方面，可以为江西省妇幼保健院临床医生在妇科恶性卵巢肿瘤早期提示，诊断治疗，疗效随访及其早期预防提供可靠的实验依据。

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The role of ROMA model combined with HE4 and CA125 in the diagnosis of ovarian cancer

Y ANG Qinhzhong1，FU Hongwei2，LI Xingshan3.1.Nuclear Medicine Dept，Jiangxi Maternal and Child Health Hospital，Jiangxi Nanchang 330006；2.Department of Clinical Laboratory，Jiangxi Provincial People’s Hospital，Jiangxi Nanchang 330006.

Objective To investigate the diagnostic value of combination detection of human epididymis protein 4(HE4)，carbohydrate antigen 125(CAl25)and the Risk of Ovarian Malignancy Algorithm(ROMA)in diagnosis of ovarian carcinoma．Methods Chemiluminescence immunoassay was used to detect the serum concentration of HE4 and CAl25 by in patients of ovarian carcinoma group(n=l00)，benign ovarian neoplasm group(n=100)and female healthy control group(n=100)．The ROMA based on the serum concentration of CAl25，HE4 and a woman’s menopausal status was used to calculate the predicted probability(PP)and estimate diagnostic results of the PP．Results⑴The median levels and standard deviation of HE4 and CAl25 were significantly higher in ovarian carcinoma group(320．2±210．6pmoL/L and 350．6±162．8kU/L，respectively)than those of the benign ovarian neoplasm group(52．8±12．6pmoL/L and 32．6±10．5kU/L，respectively)and female healthy control group(36．4±12．8pmoL/L and 21．4±8．2kU/L，respectively)(P＜0．01)．⑵The ROMA cut－off point classifying patients into high and low risk groups was established as 11．4%in premenopausal and 29．9%in postmenopausal women．The diagnosis sensitivity，specificity，positive predictive value and negative predictive value in premenopausal patients were respectively 87．0%，83．8%，71．1%and 93．4%；and those of the postmenopausal group were 88．4%，81．3%，91．0%and 76．5%．Conclusions Determination of ROMA combined with HE4 and CAl25 in patients with ovarian cancer is helpful to improve the accuracy of diagnosis of ovarian cancer．

Risk of ovarian malignancy algorithm；Human epididymis protein 4；Carbohydrate antigen 125；Ovarian neoplasms

R711．75，R446．62

A

1674－1129(2017)02－0160－03

10．3969/j.issn.1674－1129．2017．02．007

2016-11-09；

2017-03-20)

江西省卫生厅科技计划项目（20133129）

杨庆忠，男，1971年生，学士学位，副主任技师，临床检验，体外标记免疫，电子邮箱：13970008992@126.com

付宏伟，男，1977年生，硕士学位，检验主管技师，生物化学与分子生物学，体外标记免疫，电子邮箱：jiangxifhw@163.com