董云虹

辽宁省辽阳市中心医院妇产科 (辽阳 111000)

p16蛋白、细胞分化抑制因子-1(Id-1)、Cav3.1、Cav3.2、p-GSK3βser9和p-GSK3β Tyr216在宫颈癌组织中的表达及其意义

董云虹

辽宁省辽阳市中心医院妇产科 (辽阳 111000)

目的：探讨p16蛋白、细胞分化抑制因子-1(Id-1)、Cav3.1、Cav3.2、p-GSK3βser9和p-GSK3β Tyr216表达水平在宫颈癌组织中的表达及其意义。方法：以我院接收治疗的30例无淋巴转移及30例淋巴转移宫颈癌患者为研究对象。应用统计学方法对两组宫颈癌变组织间各项指标表达差异进行分析处理。结果：两组患者各项指标表达水平具有显著统计学差异，且与淋巴转移及病理分级密切相关，淋巴结转移阳性癌组织p16蛋白、Id-1、Cav3.1、Cav3.2、p-GSK3βser9表达显著高于淋巴结转移阴性患者，而p-GSK3β Tyr216表达水平正好相反。结论：p16蛋白、Id-1、Cav3.1、Cav3.2、p-GSK3βser9和p-GSK3β Tyr216的表达与宫颈癌发生发展的全过程密切相关，这一结论在宫颈癌的早期诊断、预防、治疗等过程中均具有很好的临床应用价值。

宫颈癌是一种妇科常见肿瘤疾病，复发率极高，严重威胁着妇女生命健康[1]。近年来随着环境的恶化、人们生活压力的不断增大、生活节奏的不断加快，宫颈癌的发病率呈现出了逐年上升的趋势[2]。宫颈癌从癌前病变到发展为癌症一般需要十余年的时间，因此应用基因组学知识，提高对宫颈癌的临床诊断、检测水平，能够在宫颈癌变前或者是癌症早期发现病情，及时给予治疗，提高宫颈癌临床治愈率[3]。本文以对照实验探讨基因表达水平与宫颈癌的关系，进而寻找一种精确的诊断、检测宫颈癌发生发展的临床新技术。

资料与方法

1 一般资料 以我院2013年1月至2015年6月接收治疗的30例无淋巴转移及30例淋巴转移宫颈癌患者为研究对象。两组患者除病理分级、淋巴结转移具有显著差异外，年龄、文化程度均不具有显著差异。两组研究对象年龄均介于32～56岁之间，实验组所有患者均在我院经反复组织病理学明确诊断，且临床数据资料完整。

2 试剂与方法 应用免疫组织化学法分别检测两组宫颈癌组织切片各项实验指标表达水平的差异。需要的制剂有鼠抗人单克隆抗体(p16蛋白、p-GSK3βser9和p-GSK3β Tyr216)、DAP显色剂及广谱试剂盒购于北京中山生物技术有限公司，兔抗人Id-1多克隆抗体Cav3.1、Cav3.2由美国SantaCruz公司生产二氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒、APES、磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液购于福州迈新生物技术有限公司。首先取实验组宫颈癌组织及对照组正常宫颈组织制备生物标本，然后应用免疫组织化学法进行表达水平测定。

3 显著性判断方法 由两位经验丰富的病理科主任医师同时会诊，根据组织切片染色后各组织表达蛋白染色不同，在高倍镜下镜检技术结果，对p16蛋白、Id-1、Cav3.1、Cav3.2、p-GSK3βser9和p-GSK3β Tyr216表达水平差异进行统计学分析。

4 统计学方法 以统计学软件SPSS 22.0对两组患者p16蛋白、Id-1、Cav3.1、Cav3.2、p-GSK3βser9和p-GSK3β Tyr216的表达水平进行统计学分析研究，以t检验或χ2检验表示组间差异，P<0.05表示组间差异显著。

结 果

两组患者间p16蛋白、Id-1、Cav3.1、Cav3.2、p-GSK3βser9和p-GSK3β Tyr216的表达水平具有显著统计学差异，其中p16蛋白、Id-1、Cav3.1、Cav3.2、p-GSK3βser9的表达水平与淋巴结转移及病理分级密切相关，晚期癌症患者表达水平最高，早期癌症表达水平最低，而p-GSK3β Tyr216表达水平正好相反。以上统计结果均具有显著统计学差异,见表1～3。

讨 论

宫颈癌为妇科常见癌症之一，早期宫颈癌患者接受盆腔清扫术以及术后5年存活率高达90.00%以上[4]。人类基因组计划实施以来，精准治疗的概念已经在多国提出，精准治疗的本质是一种基因水平上的个体化治疗方案，以基因组学、蛋白质组学知识为依据，对疾病进行更加精细的分类和更加精准的治疗，能够达到对疾病的早期预防、诊断、治疗[5]。

表1 各组患者p16蛋白、Cav3.1、Cav3.2表达水平对比[例(%)]

注：两组各项比较P均<0.05

表2 实验组、对照组Id-1阳性表达水平对比[例(%)]

注：正常人宫颈组织Id-1阳性表达率为0，两组比较*P<0.05

表3 实验组、对照组p-GSK3βser9和p-GSK3βTyr216的表达水平对比[例(%)]

注：两组各项比较,P均<0.05

P16蛋白是直接参与细胞周期调控的抑癌基因，当机体某些组织发生癌变后，该基因被激活，并抑制癌症的发生发展[6]。Id-1在宫颈癌组织中的表达与宫颈癌临床分期以及病理分级等密切相关，近年来国内外研究表明，Id-1在宫颈癌中的表达与原癌基因受到物理、化学等因素影响激活后，癌细胞的无限繁殖呈正相关[7]。一般晚期宫颈癌患者Id-1基因表达水平显著高于早、中期未发生淋巴转移患者[8]。现代肿瘤医学研究认为，癌症与分子以及基因的改变密切相关，与此同时在细胞发生癌变后离子通道也会发生显著生物学改变。T-型钙通道有其独特的激活、失活特性。相关文献报道T-型钙通道Cav3.1、Cav3.2在调节细胞增殖过程中具有重要意义，组织发生癌变后其表达水平显著增高[9]。宫颈癌组织中糖原合成酶激酶3β具有一定的生物学功能，能够调节细胞表面糖蛋白，与癌细胞的淋巴转移具有密切关系。研究表明GSK3β的磷酸化与宫颈癌临床病理分级以及癌扩散转移具有一定的相关性，即磷酸化位点的活化是GSK3β活性调节的主要方式[10]。其中，ser9位点磷酸化能够抑制GSK3β基因表达，使GSK3β功能性失活，因此晚期癌症患者p-GSK3βser9增高，而Tyr216位点磷酸化可激活GSK3β活性，因此在早期患者体内表达水平较高。

本次研究结果表明，早期宫颈癌患者p16蛋白、Id-1、Cav3.1、Cav3.2、p-GSK3βser9的表达水平均低于晚期宫颈癌患者，而p-GSK3β Tyr216表达水平较晚期宫颈癌患者高。综上所述，p16蛋白、Id-1、Cav3.1、Cav3.2、p-GSK3βser9、p-GSK3β Tyr216表达水平在宫颈癌疾病的早期诊断、预防、治疗中具有十分重要的临床应用价值。

[1] 朱素英.CK19和CK20mRNA在宫颈癌患者外周血中的表达及临床意义[J].陕西医学杂志,2012,41(2):142-143.

[2] 胡尚英,郑荣寿,赵方辉,等.1989至2008年中国女性子宫颈癌发病和死亡趋势分析[J].中国医学利学院学报,2014,36(2):119-125.

[3] 江 涛,李隆玉,潘玫曾,等.p16在宫颈癌组织中的表达及其意义[J].实用癌症杂志,2005,20(6):581-583.

[4] 胡云峰,雷 侠,赵 红.多西他赛与顺铂配伍放疗治疗中晚期宫颈癌68例对比观察[J],陕西医学杂志,2012,41(5):605-607.

[5] 钱其军,吴孟超.肿瘤精准细胞免疫治疗:梦想照进现实[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2015,22(2):151-158.

[6] 郭瑞霞.hTERC基因和P16蛋白在子宫颈组织的表达及其意义[J].中国妇产科临床杂志,2012,13(4):278-281.

[7] 马莉娟,何金彩,柴泽英.细胞分化抑制因子-1与细胞增殖核抗原Ki - 67在宫颈癌中的表达及相关性研究[J].中国临床药理学杂志,2015,31(8):627-630.

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[9] 张彬彬,李 威,张淑兰.Cav3.1、Cav3.2在宫颈癌组织中的表达及其意义[J].中国妇幼保健,2014,29(32):5296-5298.

[10] 陈良凤,张 颖,王仲奇,等.Gsk3β、p-GSK3βser9和p-GSK3β Tyr216在宫颈癌组织中的表达及临床意义[J].中国妇幼健康研究,2015,26(5):934-937.

(收稿：2016-11-02)

子宫颈肿瘤 基因, p16 @细胞分化抑制因子-1

R737.33

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2017.04.037