王 攀，刘运超，魏 蔷，柴书军，陈玉梅，张改平,3*

(1.西北农林科技大学 动物医学院，陕西 杨凌 712100； 2.河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室/农业部动物免疫学重点实验室，河南 郑州 450002；3.河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 450002)

狂犬病病毒G蛋白的原核表达及反应原性分析

王 攀1,2，刘运超2，魏 蔷2，柴书军2，陈玉梅2，张改平1,2,3*

(1.西北农林科技大学 动物医学院，陕西 杨凌 712100； 2.河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室/农业部动物免疫学重点实验室，河南 郑州 450002；3.河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 450002)

为优化狂犬病病毒G蛋白的原核表达条件,探究其反应原性，参照狂犬病病毒CTN-1V10株编码G蛋白基因序列，采用生物工程合成的方法合成编码G蛋白的基因片段，并将该片段命名为G5F。将该片段与pET-28a原核表达载体连接，构建重组表达质粒pET-G5F，并将重组质粒进行诱导表达，在IPTG浓度为0.2 mmol/L、温度为20 ℃、诱导12 h时，重组蛋白表达量最高。SDS-PAGE电泳及Western blot分析表明， G5F重组蛋白可溶性表达量高，且可以被抗狂犬病病毒单克隆抗体识别，反应原性良好。

狂犬病病毒； G蛋白； 可溶性表达； 反应原性

狂犬病(rabies)是由狂犬病病毒(rabies virus,RABV)引起的，是最致命的传染病之一，死亡率接近100%[1]。RABV是狂犬病毒属(Lyssavirusgenus)弹状病毒科(Rhabdoviridae family)的单股负链RNA病毒，可引起人类、家畜及野生动物急性脑膜炎而导致死亡，并可在大多数哺乳动物中广泛传播[2]。狂犬病主要通过被RABV感染动物的撕咬、抓挠受伤而感染。我国狂犬病的主要传播源是被RABV感染的狗和猫等[3]。……