涂文亚，曾 驰

(武汉轻工大学 生物与制药工程学院，湖北 武汉 430023)

脊柱关节病致敏蛋白HLA-B27的非经典同源二聚体的表达与纯化

涂文亚，曾 驰

(武汉轻工大学 生物与制药工程学院，湖北 武汉 430023)

强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis)与人体白细胞抗原HLA-B27编码基因高度相关。强直性脊柱炎的发病机制至今尚不明确。HLA-B27重链同源二聚导致强直性脊柱炎的假说近年来受到关注。但是一直缺乏结构的数据去分析证实这种假说。解析HLA-B27同源二聚体的结构有望从结构角度阐明强直性脊柱炎的分子机理，并为后续的药物设计和过敏预防提供理论基础。本研究在E.coli中表达出包涵体形式的HLA-B27蛋白，将包涵体溶解、复性和纯化。最终从20 mg HLA-B27包涵体中得到0.2 mg纯度高且性状均一的HLA-B27同源二聚体，为获得高质量HLA-B27同源二聚体蛋白晶体及结构数据奠定了重要基础。

强直性关节炎;HLA-B27;同源二聚体;纯化

1 引言

强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis, AS)是脊柱关节病(spondyloarthritides, SpA)的一种，属于风湿性疾病。强直性脊柱炎与HLA-b27基因高度相关，94%的强直性脊椎炎患者其HLA-B27抗原表达为阳性[1]。强直性脊柱炎的发病机制至今尚不明确，有效的治疗方案也比较匮乏。关于HLA-B27致强直性脊柱炎机制，主要有2种假说[2]。

第一种假说是风湿性病原多肽提呈理论。HLA(人体白细胞抗原)在体内承担1种经典角色，即与β2m(β2-微球蛋白)、病原多肽形成异源三聚复合物，提呈多肽被TCR(T细胞受体)识别，激活T细胞，引发下游炎症反应[3]。HLA-B27可能也是通过类似方式，将人体的某些与抗原肽高度相似的内源肽提呈给TCR，导致炎症反应，并且这种反应是持续的[4]。……